本制品是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的蛋白上样缓冲液。可以直接用于细胞或组织样品的裂解,并用于后续常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。使用1×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液直接裂解蛋白样品的优点是比较便捷;缺点是裂解好的蛋白样品不能用常规的Bradford法或BCA法测定蛋白浓度。这样蛋白上样量的均一性就较难控制,需要借...
将沉淀重新悬浮在适当体积(100-500 μl)的1X SDS样品缓冲液中。 ❖ WB检测。 4 其他 ❖ 裂解样本的时候要超声,使目的蛋白溶出更加充分。 ❖ 保证足够的蛋白上样量,组织样本推荐50~100μg,细胞样本推荐20~50μg。 ❖ Caspase-...
产品名称 SDS裂解液 产品用途 实验用 用途 实验用 品牌 尚宝 型号 T16008-100 T15261-10 蛋白类 5×非变性蛋白上样缓冲液(不含DTT、SDS) 10ml T15262-10 蛋白类 2×非变性蛋白上样缓冲液(不含DTT、SDS) 10ml B2050S-2×1 蛋白类 5×蛋白 Loading Buffer 2×1ml B2070S-5×1 蛋白类 6×蛋...
而酚/SDS蛋白提取法中,利用酚在SDS这种阴离子型表面活性剂的存在条件下能充分溶解蛋白的特点,可以取得在较短的时间内充分溶解植物组织中蛋白的效果,得到的蛋白纯度更高。色素较多的植物样本,为了不影响后续的分离纯化,可以在裂解液中加入适量PVP(一般是材料鲜重的10%)。 植物样本 实例:PPR蛋白的提取 PPR(Pentatricope...
1. SDS浓度：确保足够的SDS单体与蛋白质结合，浓度应足够但不超过0.5mol/L，以达到1:4或1:3的结合比例，确保分子质量测定的准确性。2. 样品缓冲液的离子强度：保持低离子强度（10～100mmol/L），利于SDS单体的充分结合。3. 二硫键还原：还原剂如β-巯基乙醇和DTT应彻底还原二硫键，以实现解聚和...
溶液Ⅱ 0.2M NaOH / 1% SDS 破细胞的主要是碱，而不是SDS，所以才叫碱法抽提。溶液Ⅲ 3M 醋酸钾 / 2M 醋酸 这一步的K置换了SDS（十二烷基磺酸钠）中的Na，得到PDS（十二烷基磺酸钾）沉淀；SDS易与蛋白质结合，平均两个氨基酸上结合一个SDS分子，钾钠离子置换所产生的大量沉淀自然就将绝大部分...
SDS裂解液, 碧云天生产的SDS裂解液(SDS Lysis Buffer)是一种比较强烈的细胞组织裂解液。SDS裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、ChIP(染色质免疫共沉淀,chromatin immunoprecipitation)等。 关于
破坏蛋白质的二级和三级结构,强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂,蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的SDS溶液中与SDS分子按比例结合,形成带负电荷的SDS蛋白质复合物,这种复合物由于结合大量的SDS,使蛋白质丧失了原有的电荷状态,形成仅保持原有原有分子大小为特征的负离子状团块,从而降低或消除了各种蛋白质分子...
SDS-PAGE电泳的原理SDS-PAGE电泳是由SDS(十二烷基硫酸钠)和还原试剂将蛋白质分子解聚后亚基的大小不同,在恒定pH(碱性)缓冲系统中对其进行分离。1969年Weber和Osborn发现在样品和聚丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和强还原剂后,蛋白质亚基的电泳迁移率就主要取决于其分子质量的大小,而电荷的因素可以被忽略。SDS是一种阴...
因此,当这种胶束在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时,迁移率不再受蛋白质分子原有电荷的影响,而主要取决于蛋白质亚基分子量的大小。当蛋白质的分子量在15KD到200KD之间时,电泳迁移率与分子量的对数呈线性关系。 蛋白质SDS-PAGE常用于蛋白质分子量的测定,蛋白质纯度的分析,蛋白质浓度的检测,免疫印迹(Western Blot)的第一...