溶液2：0.2mol/L NaOH、1% SDS。该溶液被称为裂解液，用于裂解细菌细胞，从而释放质粒。注意，这一步骤应在5分钟内完成，以防止过度降解DNA。溶液3：3mol/L 醋酸钾、2mol/L 醋酸。中和液的作用是中和溶液2中的碱性成分，以继续裂解细胞，并防止基因组DNA的污染。
SDS是一种阴离子去垢剂，它的主要作用有：①溶解细胞膜上的脂肪与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜；②解聚细胞中的核蛋白，使蛋白质与DNA分开；③SDS能与蛋白质结合成为SDS-蛋白质复合物，使蛋白质变性而沉淀；④SDS能抑制核酸酶的作用，防止对DNA的降解。(3)溶液Ⅲ的主要成分为KAc(pH4.2)。用pH...
SDS与NaOH联用，其目的是为了增强NaOH的强碱性，同时SDS作为阴离子表面活性剂破坏脂双层膜。这一步要记住两点：第一，时间不能过长，因为在这样的碱性条件下基因组DNA片断也会慢慢断裂；第二，必须温柔混合，不然基因组DNA会断裂。3、溶液Ⅲ：溶液III的作用是沉淀蛋白和中和反应。其中醋酸钾是为了使钾离...
SDS 是分离DNA 时常用的一种阴离子除垢剂,它的作用是()。1 溶解膜蛋白及脂肪,从而使细胞膜破裂 ;2 溶解核膜和核小体,使其解聚,将核酸释放出来 ;3 对RNase、DNase 有一定的抑制作用 ;4 SDS 能够与蛋白质结合使蛋白质变性沉淀 。 A.①②③B.②③④C.①③④D.①②③④ 相关知识点: 试题来源: 解...
溶液Ⅱ 0.2M NaOH / 1% SDS 破细胞的主要是碱，而不是SDS，所以才叫碱法抽提。溶液Ⅲ 3M 醋酸钾...
溶液Ⅰ的关键作用是辅助细胞处理，其中葡萄糖确保悬浮的细菌不会沉淀，而EDTA作为金属离子螯合剂，主要任务是抑制DNase活性以保护DNA。RNaseA的添加则用于去除细胞中的RNA分子。溶液Ⅱ为碱性处理溶液，NaOH用于溶解细胞膜并释放DNA。在此过程中，SDS与NaOH联用，SDS的阴离子表面活性剂性质有助于破坏细胞膜，...
葡萄、哈密瓜 C. 菠萝、柑橘、荔枝 D. 苹果、香蕉、梨 相关知识点: 试题来源: 解析 溶解膜蛋白及脂肪,从而使细胞膜破裂 溶解核膜和核小体,使其解聚,将核酸释放出来 对 RNase 、 DNase 有一定的抑制作用 SDS 能够与蛋白质结合形成 R-O-S03— … R—- 蛋白复合物,使蛋白质变性沉淀 反馈 收藏 ...
SDS作用:与蛋白牢固结合,浓度大于1 mmol/L时,与蛋白质的结合比例为1.4g SDS/1g蛋白质,由于十二烷基硫酸根带负电荷,使得SDS-蛋白质复合物都带有相同密度的负电荷,掩盖蛋白质分子间天然的电荷差异。这种复合物的分子构型几乎相同,具有相同的荷质比,使其不再受所带电荷及分子形状的影响,因此在SDS-PAGE中,SDS-蛋白...
1、SDS阴离子去污剂变性剂助溶性试剂断裂分子内和分子间的氢键分子去折叠破坏蛋白质分子的二级和三级结构 2、强还原剂巯基乙醇（β-mercaptoethanal）二硫苏糖醇（dithiothreitol，DTT）使半胱氨酸残基之间的二硫键断裂。SDS和还原剂的作用：（1）分子被解聚或组成它们的多肽键（2）氨基酸侧链与SDS充分结合形成带...