RNA提取是RT-qPCR实验成功的首要步骤,RNA的质量直接关乎RT-qPCR实验的结果。但是在实验过程中我们经常会碰到RNA提取实验翻车的情况,主要是因为RNA的分子结构不稳定和无处不在的RNase对RNA的降解造成的。 由此可见,想要提取到高质量的RNA并非易事。今天,小翌主要从样本选择、样本采集与保存、RNA提取这三个方面来阐述R...
通常rt primer可分为三类:oligo dt,随机引物和基因特异性引物。根据不同的实验需求选择适合的引物进行使用。 ² 如果模板为真核生物来源,且后期cdna用于常规pcr扩增,建议选择oligo(dt);若后续实验仅用于qpcr,建议将oligo(dt)与随机引物混合后使用,可提高反转录效率。 ² 如果模板为原核生物来源,反转录请选用rand...
TaqPath 一步法 RT-qPCR 预混液 (CG) 已根据类似的竞品预混液进行了基准测试,并在多种靶标间表现出相同或更好的灵敏度和动态范围(图6)。 抑制剂耐受性 与市场上的其他预混液不同,TaqPath 一步法 RT-qPCR 预混液采用独特的专有配方,即使存在通常可以抑制 PCR 的物质(如肝素、血红素或 EDTA)时,也能提供...
1.RT-PCR,qPCR,Real-time PCR,RT-qPCR区分 RT-PCR指的是逆转录PCR(Reverse Transcription PCR),在RT-PCR中,RNA逆转录为cDNA,以cDNA为模板通过PCR进行DNA扩增; qPCR和Real-time PCR均指实时荧光定量PCR(Quantitative Real-Time PCR),相较于常规PCR,qPCR能够在每个循环周期内对扩增产物进行实时定量,从而对起始模板...
Human T-cell Lymphoma Virus 1 RT-qPCR Kit(Probe Method)产品规格:50次发货周期:1～3天产品价格:询价本产品仅可用于科研实验,严禁用于其他非科研用途!本制品是以探针法荧光定量PCR技术为基础开发的HTLV-I病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒。 人类嗜T淋巴细胞病毒1型(Human T-lymphotropic Virus 1,HTLV 1)主要...
▲图1:RT-qPCR基本流程 1、实验设计 正确的实验设计是任何基因表达研究的关键。由于mRNA转录对与研究过程无关的外部刺激敏感,因此严格控制和设计实验条件的工作是十分重要的。其中包括了确定实验程序、对照组、重复组的类型和数量、实验条件以及各组内的样品处理方法等,这些对于最小化变异性至关重要(表1)。
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活组织等DNA扩增检测。 PCR常见问题 假阴性,不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有:①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析...
多重PCR、In situ PCR、Reverse PCR、RT-PCR和qPCR 多种PCR技术的衍生，如多重PCR允许同时扩增多个目标序列；In situ PCR在组织样本原位进行扩增，适用于病理学研究；Reverse PCR用于检测病毒核酸；RT-PCR结合RNA反转录和PCR，适用于RNA检测；qPCR（定量PCR）通过荧光检测实时监控PCR扩增过程，提高了检测...
timePCR均指实时荧光定量PCR(QuantitativeReal-Time PCR),相较于常规PCR,qPCR能够在每个循环周期内对扩增产物进行实时定量,从而对起始模板数量进行精确的分析,具有高敏感度和特异性;RT-qPCR指的是实时逆转录PCR(Reverse Transcription- quantitative PCR),是qPCR RT-PCR的组合,将mRNA逆转录为cDNA后再作为模板进行qPCR...
TaqPath 一步法 RT-qPCR 预混液 (CG) 是一种通用试剂 (GPR),标记为‘供实验室使用’,在经过 ISO 13485 认证、向 FDA 注册且符合 cGMP 标准的工厂中生产。TaqPath 一步法 RT-qPCR 预混液 (CG) 具有优异质量和极佳性能,是满足诊断检测或开发需求的绝佳选择。 TaqPath 一部分 RT-qPCR 预混液 (CG) 的...