【目的】1,采用免疫组织化学染色方法检测细胞外基质蛋白1(extracellular matrix protein 1,ECM1)在正常肝组织和肝癌组织中的表达情况,分析ECM1表达水平与肝癌临床病理特征及生存预后间的关系,及其与上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transitions,EMT)有关标志物(Vimentin和E-cadherin)的相关性,初步探讨ECM1在肝癌侵袭...
pEGFP-N2-ECM1重组质粒的构建及其在人肝癌细胞系SMMC-7721中的表达
目的 构建细胞外基质蛋白1基因(ECMl)的真核表达载体ECM1-pEGFP-N2,检测其在人乳腺癌细胞系MCF-7中表达.方法 采用PCR方法,以ECM1 cDNA为模板,扩增出ECM1基因,用BglⅡ和Kpn Ⅰ双酶切ECM1基因和pEGFP-N2载体,连接酶切目的片段,转化大肠杆菌DH5,筛选阳性克隆酶切,测序鉴定;利用脂质体介导的转染技术转染MCF-...
目的构建细胞外基质蛋白-1(ECM1)稳定表达的SMMC-7721肝癌细胞系.方法应用PCR和DNA重组技术构建pEGFP-N2-ECM1真核表达载体,经酶切,测序鉴定正确后,用脂质体转染SMMC-7721细胞,G418药物筛选稳定转染的细胞系.荧光显微镜检测融合蛋白表达,RT-PCR技术检测ECM1基因表达.结果构建的重组质粒经双酶切及测序分析鉴定,结果证实...
目的 构建细胞外基质蛋白1基因(ECMl)的真核表达载体ECM1-pEGFP-N2,检测其在人乳腺癌细胞系MCF-7中表达.方法 采用PCR方法,以ECM1 cDNA为模板,扩增出ECM1基因,用BglⅡ和Kpn Ⅰ双酶切ECM1基因和pEGFP-N2载体,连接酶切目的片段,转化大肠杆菌DH5,筛选阳性克隆酶切,测序鉴定;利用脂质体介导的转染技术转染MCF-......