使用简并引物是为了增强引物的通用性,即不同DNA序列的目的基因都可以用这种引物进行PCR扩增。其定义是为了获得序列未完全清楚的核酸的一种引物设计方案,特点是所设计的引物序列某位置的核苷酸可以分别是两个或两个以上不同的碱基,结果所合成的引物是该位置上不同序列的混合物。设计原则是把代表编码单个...
PCR产物是介于引物的5’端之间的双链DNA片段。 引物设计应注意: (1)引物长度约16~30bp,并且一对引物间的G+C含量相似 (2)引物中G+C含量应占到45%~60%,以确保退火温度(3)引物3’端应与目的序列完全配对, 引物3’端之间不能互补 (4)四种碱基应随机分布,(5) 5’端碱基可不与模板配对...