细胞质(可溶):Tris-HCl 细胞质(细胞骨架):Tris-Triton 细胞膜:NP-40 或 RIPA 细胞核:RIPA 线粒体:RIPA RIPA 裂解液配方 1ml RIPA buffer contains 35μl proteinase inhibitor and 10μl phosphatase inhibitor RIPA buffer 最终浓度 1M Tris-HCl 5 ml 50mM NaCl 0.87g 0.15 M Na-deoxycholale 0.1g (...
0.5 MTris-HCl(pH 6.8):1.2ml 甘油:2.5ml 10%(w/v)SDS:2ml 溴酚蓝:0.01g β-巯基乙醇0.5ml 去离子水补齐至10ml -20℃存放备用,用之前37℃轻轻混匀溶液至SDS全溶。 【实验步骤】 1.样品制备 取出-20℃保存的BL21(pET-cry9ea)菌体沉淀,加入80μlddH2O重悬沉淀,加入20μl5X上样缓冲液混匀,沸水浴...
16410-500 常规溶液 Tris-HCl缓冲液(25mM,pH=8.0) 500ml T15189-100 常规溶液 Tris-HCl缓冲液(0.5M,pH=6.8) 100ml T15189-500 常规溶液 Tris-HCl缓冲液(0.5M,pH=6.8) 500ml T1721-100 常规溶液 Tris-Hcl缓冲液(0.1M,pH=8.0) 100ml T1721-500 常规溶液 Tris-Hcl缓冲液(0.1M,pH=8.0) 500ml T1633...
促销1:购买琼脂糖和TrackIt™ Ladder (从A组和B组中任选一个),最高立减386元促销代码Rladder 根据应用领域及DNA大小的不同,使用的琼脂糖凝胶的类型会影响DNA条带的分辨率。凝胶强度、凝胶熔解温度和电内渗是选择合适的...
取50mm碳酸盐包缓冲液对抗原进行稀释,将其加入聚苯乙烯的反应孔中,加盖处理后,在温度4℃的条件下放置24h,次日洗涤3次后,抛干,在每孔中均加入稀释液(pH值为7.4,0.02mol/L Tris-HCl缓冲液)稀释的待测标本0.1mL,并加入阳性和阴性对照标本,在温度为42℃的条件下放置60min,将液体移除并洗涤3次后,抛干,在每孔...
[0122](3)检测缓冲液(每50mL溶液: 100mM NaCl(1mL 5M); 50mM MgCl2(2.5mL 1M);100mM 三羟甲基氨基甲烷(Tris)-HCl(5mL 1M, pH9.5); 0.1%Tween-20; 1mM左旋咪唑(50uL 1M)) 洗2次, 每次5min; [0123](4)加入200uL AP底物染色缓冲液(每1mL检测缓冲液加入: 4.5uL NBT,3.5uL BCIP 又称X-磷酸...
一. 导言 1. 质粒DNA的分离 应用质粒作为基因克隆的载体，—个重要的条件是要获得批量的纯化的质粒DNA 制剂。通常所说的质粒DNA的制备，事实上包括质粒DNA的分离和质粒DNA纯化 两个步骤或两个内容。 ⑴ 质粒DNA的分离 这是指应用溶菌酶或是十二烷硫酸钠(SDS)处理大肠杆菌寄主细胞，使之完 ...
用NADPH,由狗、人、兔和大鼠得到的肝S-9成分用作辅因子。检测条件如下S-9(3 mg/mL),NADPH(0.83 mM),pH 7.4的Tris-HCl缓冲剂(50 mM)和10μM试验化合物。 通过加入试验化合物开始反应,并在0、1、5、15和30分钟后通过将样品中的pH升到10以上(NaOH;1 mM)终止反应。溶剂萃取后,通过LC(荧光/UV检测)测量...
(150 mM NaCl, 50 mM Tris–HCl, 5 mM EDTA-2Na and 1 mM MgCl2) containing 1% nonidet P40, 0.3% Triton X-100 and 0.5% SDS and a cocktail of protease inhibitors (SigmaFAST; Sigma) and phosphatase inhibitors (20 mmo...
聚合酶链式反应（PCR）聚合酶链式反应（Polymerize Chain Reaction，PCR）是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，为最常用的分子生物学技术之一。典型的PCR由（1）高温变性模板；（2）引物与模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是：将待扩增的模板...