通透剂(Triton X-100,弱) 说明书
使用溶于PBS的4%甲醛溶液进行细胞固定,室温固定10min; 室温条件下,用PBS清洗细胞2~3次,每次10min; 室温条件下,用0.5% Triton X-100溶液透化处理5min; 室温条件下,用PBS清洗细胞2~3次,每次10min; 取200µL配制好的罗丹明标记鬼笔环肽工作液,覆盖住盖玻片上的细...
1.PBS 洗涤样本 3 次, 4% 多聚甲醛固定 15 min,然后用 0.5% Triton X-100 处理 15 min。 2.用 Nile Red 工作液在室温下染色 60 分钟。 3.染色结束,去除多余的染料,用 PBS 洗涤细胞 3 次。 4. 使用光学显微镜拍摄照片。 ■BODIPY 脂滴类染料 此外,BODIPY 类...
答:EDTA是一种金属螯合剂,它可以和钙镁离子相结合,而钙镁离子是细胞之间连结的重要金属离子,除去钙镁离子将影响到细胞之间的结合,因此可用EDTA来破坏细胞之间的连结,从而达到分离细胞的目的。 3.微丝观察试验中,1%Triton X-100处理细胞的作用是什么?此实验是否能看到微管、中间纤维?为什么?答:(1)其作用是抽提细胞...
它们对细胞形态的维持,细胞的生长、运动、分裂、分化,物质运输,能量转换,信息传递,基因表达的起到重要作用。细胞骨架在通常固定条件下不稳定,如低温、高压、酸处理等。当采用适当的手段,如M-缓冲液洗涤细胞,可以提高细胞骨架的稳定性,戊二醛在室温下固定能较好的保存细胞骨架的成分,另外,Triton X-100处理能抽取掉一...
由于细胞经TritonX-100抽提后剩下的主要是细胞骨架成分,使得显现更清晰。细胞骨架是指细胞质中纵横交错的纤维网络结构,按组成成分和形态结构的不同可分为微管、微丝和中间纤维。它们对细胞形态的维持、细胞的生长、运动、分裂、分化和物质运输等起重要作用。光学显微镜下细胞骨架的形态学观察多用1%TritonX-100处理细...
3.TritonX-100处理后各步操作应轻柔,避免容器剧烈震荡及吸管吹打过猛引起骨架蛋白束断裂。 3、说明在实验中用1%TritonX- 100处理细胞的作用。 用适当浓度的TritonX-100处理植物细胞,可以抽提掉细胞质内的可溶性蛋白和脂类,而骨架蛋白却保存完好。 4、根据M-缓冲液的成分分析其作用 在M-缓冲液中: (1)咪唑是缓...
具体的,本发明创造性地利用非离子表面活性剂TrionX-100,增加生物炭与微生物间的结合性,同时促进生物炭吸附有机污染物,从而整体上起到提高生物炭固定化微生物材料对污染物去除效率的作用。 本发明固定化微生物材料的制备方法简单,耗能少,得到的TritonX-100强化生物炭固定化微生物材料相较于传统吸附法固定化微生物对...
5.加入0.5 % Triton X-100通透处理约10min。 6.用37℃预温PEM漂洗3次。 7.取一个洁净的载玻片,按照载玻片的大小在其上放置一条封口膜,在封口膜上上滴加10ul 55nM Alexa-568-phalloidin (绿),将经上述处理的盖玻片细胞面向下孵育于染色液中,于湿盒中室温避光染色30min。 8.小心取下盖玻片,将其置于小平...
常用的渗透剂有0.1% Triton X-100或0.5% Tween-20等,可以使细胞膜通透性增加,从而使得抗体能够进入细胞内。 5.阻断处理: 为了避免非特异性结合,需要对细胞进行阻断处理。常见的阻断剂有1%牛血清白蛋白(BSA)或3%牛血清等,可以减少背景信号的干扰。 6.抗体孵育: 在细胞上加入特异性的一抗,让其与目标蛋白质结合...