1.培养基配制：使用含有LIF（白血病抑制因子）和Feed细胞（如STO细胞或原代胚胎成纤维细胞）的高糖DMEM培养基来阻止ES细胞的分化。也可以采用无Feed细胞的培养基，但需要添加LIF和其他必要的生长因子。2.明胶包被：为细胞提供包被有0.1%明胶的平板作为粘附细胞的基质。将明胶溶液加入培养板或培养皿中，室温放置一段时间...
建议每2-3天从达到80%-90%融合的平板按1:8的比率传代细胞一次,细胞传代以后,在将细胞接种在0.1%明胶包被的培养皿之前,通过预先将细胞接种在没有经过包被的组织培养板2个小时,使分化细胞粘附,从而将分化和未分化细胞分开。将细胞全程置于37℃,5%CO2,100%湿度条件下培养。 如果在Feed细胞,那么就需要采用MMC进行处...
【题文】小鼠作为一种与人类基因组序列相似度较高的哺乳动物,常用于人类某些疾病的研究。小鼠胚胎干细胞的培养过程如图1所示;科研工作者常常将单克隆抗体与细胞毒素类药物偶联起来
胚胎干细胞 (1)哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞,来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来. (2)具有胚胎细胞的特性,在形态上表现为体积小,细胞核大,核仁明显;在功能上,具有发育的全能性,可分化为成年动物体内任何一种组织细胞.另外,在体外培养的条件下,可以增殖而不发生分化,可进行冷冻保存,也可进行遗传改造. ...
下面将为您介绍小鼠胚胎干细胞培养的一般步骤。 一、准备实验所需材料和器械: 1.小鼠胚胎干细胞系(ES细胞系)。 2.ESC培养基:一般使用含有LIF(鼠胚性干细胞生长因子)的培养基,如DMEM/F12或DMEM培养基,添加血清、LIF等。 3.ESC传代培养基:与ESC培养基相同,但不含LIF。 4.ESC学习培养基:免LIF和血清的无血清...
•了解原代细胞培养的一般方法与步骤 •了解培养细胞的消化分散 •了解倒置显微镜的使用 二、实验材料 •实验动物:孕鼠或新生小鼠 •液体:细胞生长液(内含20%小牛血清) 0.25%胰蛋白酶 平衡盐溶液 70%乙醇 •器材:灭菌镊子、剪刀若干把 灭菌培养皿、细胞培养瓶、小瓶、烧杯若干个 吸管若干支 酒精灯 原代...
小鼠胚胎干细胞的培养对于基础研究、药物筛选、细胞治疗等领域具有重要意义。三、实验步骤1. 准备实验材料：小鼠胚胎、培养基、细胞培养皿、显微镜、移液管等。2. 分离胚胎干细胞：将小鼠胚胎置于无菌环境下，使用显微镜观察并分离出内细胞团。3. 培养胚胎干细胞：将分离出的内细胞团接种于培养基中，置于37℃、5% ...
【题目】将鼠胚胎干细胞(E细胞)种植于饲养层细胞上,添加干细胞因子、血小板生成素及动物细胞培养液,培养六天后,检测发现86%的细胞形态与结构特征呈现出造血干细胞样细胞(CD34+细胞)的特点。下列有关叙述错误的是()A.从早期胚胎中分离出来的细胞就是E细胞B.干细胞因子等物质可促进ES细胞分化形成CD34+细胞C.ES细胞...
胚胎干细胞可用于治疗性克隆,图中胚胎干细胞分化后的组织移入小鼠替代病变器官属于治疗性克隆,该过程需要把胚胎干细胞在一定的条件下,通过离体培养和诱导分化形成不同的组织和器官,然后才能进行移植,C正确;D、据图可知,图中提供细胞核的供体是患病鼠,故图中重组细胞重编程、分裂、分化最终产生的小鼠与患病鼠性状相似...
-从小鼠胚胎体内收集纤维母细胞。 - 将纤维母细胞转移到含有DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)和10%胎牛血清的细胞培养皿中。 -培养纤维母细胞在37摄氏度、5%二氧化碳的培养箱中直至细胞接触起离皿表面。 6.制备和维持小鼠胚胎干细胞: -转接分裂期的小鼠胚胎干细胞到新的培养皿中。 -用无菌吸管或离心管...