中国农业科学院哈尔滨兽医研究所。适用范围 本标准规定了实验动物小鼠细小病毒MPV 株实时荧光PCR 检测方法。 本标准适用于实验动物怀疑本病发生、实验动物接种物、实验动物环境和动物源性生物制品中小鼠细小病毒MPV 株的检测。技术内容 术语、定义及缩略语、检测方法原理、主要设备和材料、试剂、检测方法、结果判定。
从鼠盒收集的粪样在室温保存7d,PCR试验为阳性。通过这个研 究,表明MPV和MVM粪便PCR是一种有效的筛选鼠群感染细小病毒的活检方法。我们推荐检测8—9周龄 小鼠的粪便。样本可在环境温度中运输而不会影响检测结果。 巩薇 译白52ndAALAsNationalMeetingOctober21—25,2001 贺争鸣 校...
上传人:jerrymum·上传时间:2019-04-26
目的建立同时检测小鼠微小病毒(MVM)和小鼠细小病毒(MPV)的荧光定量PCR方法,并进行初步应用。方法比对NCBI上发表的MVM和MPV基因组序列,设计1对引物和探针,可同时检测MVM和MPV。考察MVM-MPV引物探针的特异性和灵敏度,并对178份清洁级小鼠粪便DNA样本进行检测。结果 MVM-MPV荧光定量PCR方法最佳线性范围为10~9~10~4拷贝...
摘要: 目的:建立同时检测小鼠微小病毒(MVM)和小鼠细小病毒(MPV)的荧光定量PCR方法,并进行初步应用. 方法:比对NCBI上发表的MVM和MPV基因组序列,设计1对引物和探针,可同时检测MVM和MPV.考察MVM-MPV引物探针的特异性和灵敏度,并对178份清洁级小鼠粪便DNA样本进行检测. 结果:MVM-... 查看全部>> ...
结果建立的双重PCR方法以H-1和KRV为模板能够分别扩增出183 bp和302 bp 2个条带,敏感性验证显示能够检测到的最低H-1量为3.8 pg/mL,最低KRV量为0.73 pg/mL;在以小鼠微小病毒、犬细小病毒和猫细小病毒为模板时无任何条带扩增出,特异性良好。感染第2天在所有大鼠粪便中均检测到病毒核酸,感染大鼠均无明显临床...
目的 建立快速检测实验小鼠细小病毒,仙台病毒双重PCR 方法.方法 根据文献和病毒基因序列设计特异性引物;经过双重PCR 优化,特异性和敏感性的检测,建立双重PCR 体系.应用该PCR 体系检测人工感染组织DNA 样本和实验动物组织样本,并与ELISA 方法比对.结果 双重PCR 扩增出仙台病毒(Sendai virus)(507 bp)和小鼠细小病毒(Mi...
适用范围 本标准规定了实验动物小鼠细小病毒MVM 株普通PCR 和实时荧光PCR 检测方法。 本标准适用于实验动物怀疑本病发生、实验动物接种物、实验动物环境和动物源性生物制品中小鼠细小病毒MVM 株的检测。技术内容 术语、定义及缩略语、检测方法原理、主要设备和材料、试剂、检测方法、结果判定。