这种方法结合了高效液相色谱(HPLC)和紫外线检测(UV detection)两种技术,用于分离、鉴定和定量分析样品中的化合物。 以下是HPLC-UV的基本原理和步骤: 1.样品准备: 样品需要被适当准备,通常包括溶解、过滤等步骤。样品可以是液体或溶解于溶剂中的化合物。 2.色谱柱选择: 选择合适的色谱柱,根据分析目的选择不同类型的...
流动相配制后要在液相分析室放置一段时间使其与室温一致后再使用,分析测试过程中要控制室温和色谱柱温度, (4)荧光梯度切换的时间每次实验都要进行微调,以保证各个色谱峰不在波长转换的时间点出峰,从而得到对称的色谱峰。调整原则:先按照最近一次PAHs正常分析的荧光梯度时间进行样品测试,待仪器平衡后,一般连续进样2针...
高效液相色谱仪的紫外检测器具有极高的灵敏度,可以检测很低浓度的化合物。这是由于紫外检测器可以利用化合物分子中的芳香族基团或共轭双键等在紫外区的吸收来进行检测,并且能够将这种吸收转化为电信号输出。 二、高选择性 紫外检测器可以通过选择合适的波长,来提高检测的选择性,使其...
我们研究了一种液芯波导紫外吸收流动池检测器,该检测器与现有的高效液相色谱-紫外系统相连接。长度为 20 厘米的TeflonAF 2400 毛细管(富临塑胶供应TeflonAF 2400管材)串联到高效液相色谱流路,使普拉克索的定量下限达到 1 纳克/毫升(与普通 0.9 厘米流动池相比,灵敏度提高了 20)。这样就能在 22.5 分钟内通过一次色...
高效液相色谱法的优点是分离效率高、选择性好、操作简单等。它在环境监测、食品安全、药物分析等领域得到广泛应用。 紫外光谱法是一种研究物质与紫外光的相互作用的方法。它基于物质吸收紫外光的特性,通过测量物质在紫外光区域的吸收程度来获得样品的特征信息。紫外光谱法可以用来确定物质的结构、浓度、纯度等。该方法...
高效液相色谱紫外光检测法是一种常见且广泛应用的分析方法。其原理基于物质对紫外光的吸收特性,通过测量样品在不同波长下的吸光度来确定样品中目标化合物的含量。 在该方法中,先将待测样品溶解于适当的溶剂中,并注入到高效液相色谱仪进行分离。待分离出目标化合物后,进入紫外可见光检测器进行检测。紫外检测器使用一个...
1 色谱柱的选择 1.1 不同类型色谱柱上核苷酸的保留情况 HILIC法为反相离子对液相方法提供了可行的替代方法,是分离和保留极性或可电离化合物(即lgP低于0的化合物)的最成功方法之一。本实验测试来自6 个制造商的8 种类型的HILIC色谱柱,固定相...
岛津高效液相色谱紫外检测器的波长范围通常是190-800纳米,可根据待检测物质的特点进行调整。在使用过程中,需根据样品的化学特性选择合适的检测波长进行测定。 三、选择色谱柱时需要考虑的因素 在进行高效液相色谱分析时,除了选择适合的检测器外,还需要选择合适的...
液相色谱检测器的作用是将柱流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信号,常用检测器有紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等。 1 紫外吸收检测器 紫外吸收(UV)检测器是目前HPLC应用最广泛的检测器。其工作原理是朗伯-比尔定律。这种检测器灵敏度高,线性范围宽,对流速和温度变化不敏感,可用于梯度洗脱分离。
HILIC模式常用的缓冲盐类型有铵盐和磷酸盐,磷酸盐和乙酸铵的截止波长均小于220 nm,均适合UV检测的高效液相色谱分析。乙酸铵的缓冲范围为3.8<pH<5.8,实验过程中发现,即使乙酸铵的浓度达到100 mmol/L,5 种核苷酸也不能达到基线分离。磷酸盐具有3 个pKa值,在允许缓冲pKaf 1 pH单位的情况下,3 个缓冲范围为1.1<pH<...