将装有大鼠骨髓液的15 mL离心管，1500 rpm离心5 min；弃上清，用完全培养基重悬沉淀；将培养基重悬的细胞悬液缓慢滴加到Percoll分离液（用PBS稀释）上方，形成密度梯度分离液；2000~2500 rpm离心25 min，吸取中间层的白色雾状细胞层，加入PBS清洗细胞，1800 rpm离心5 min；弃上清，保留细胞沉淀；用细胞完全培养基...
人骨髓间充质干细胞提取方法 人骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)的提取方法主要有以下几种: 1.离心沉积法:通过采集骨髓样本后,使用离心机进行离心,将骨髓中的红白细胞分离,并将沉积在离心管底部的间充质干细胞收集。 2.粘附法:将骨髓样本放入培养皿中,使细胞在培养皿内粘附并扩增,再通过培养基的更换来去除非粘附的...
03 用眼科剪剪去股骨和胫骨的两端，暴露骨髓腔（图1-2）。04 用注射器以完全培养基反复冲洗骨髓腔直至骨头发白（图1-3）。05 收集骨髓液（图1-4），离心（图1-5），后加入适当培养基（含20%血清）（图1-6）接种于培养基皿（图1-7）中置于37℃，5％ CO2，饱和湿度的细胞培养箱中培养（图1-8）。
剪掉胫骨、股骨的干骺端,用5号空针针头插入骨髓腔,用DMEM培养液从干骺端和另一端骨髓反复冲洗多次,借助移液器对培养皿中骨髓冲洗液行反复吹打,消除细胞团,得到单细胞悬液;在室温下对骨髓细胞悬液离心,1000rpm,离心5分钟,弃上清,再将沉淀稀释于含15%胎牛血清(FBS)的DMEMF-...
方法:将磷酸缓冲盐溶液与人骨髓组织等比例混匀后离心使骨髓组织分层,取白膜层提取人骨髓间充质干细胞,与全骨髓贴壁法提取的人骨髓间充质干细胞进行对比。采用流式细胞分析及诱导多向分化实验进行鉴定。通过细胞计数、结晶紫染色、细胞骨架染色、划痕实验、Transwell迁移实验、RT-PCR等方法,分析两组细胞的原代细胞数目、...
且能够短时间提取骨髓间充质干细胞的方法则可进一步提高实验效率.目的:介绍一种新的提取人骨髓间充质干细胞的方法,并与传统方法进行比较,证明新方法的可行性及实用性.方法:将磷酸缓冲盐溶液与人骨髓组织等比例混匀后离心使骨髓组织分层,取白膜层提取人骨髓间充质干细胞,与全骨髓贴壁法提取的人骨髓间充质干细胞...
方法:将磷酸缓冲盐溶液与人骨髓组织等比例混匀后离心使骨髓组织分层,取白膜层提取人骨髓间充质干细胞,与全骨髓贴壁法提取的人骨髓间充质干细胞进行对比。采用流式细胞分析及诱导多向分化实验进行鉴定。通过细胞计数、结晶紫染色、细胞骨...
1、小鼠骨髓提取法 首先,从小鼠的尾部提取约5毫升血液。然后,将血液离心,获得红细胞和血浆。血浆中含有间充质干细胞。接下来,通过免疫学实验筛选出间充质干细胞。最后,通过透射电子显微镜观察细胞形态,确保细胞结构完整。 2、人骨髓提取法 从成年供体获取新鲜的人骨髓,并将其冷冻保存。在实验室内,使用无菌手术刀或...
常用的提取方法包括小鼠骨髓提取法和人骨髓提取法。 1、小鼠骨髓提取法 首先,从小鼠的尾部提取约5毫升血液。然后,将血液离心,获得红细胞和血浆。血浆中含有间充质干细胞。接下来,通过免疫学实验筛选出间充质干细胞。最后,通过透射电子显微镜观察细胞形态,确保细胞结构完整。 2、人骨髓提取法 从成年供体获取新鲜的人...
大鼠骨髓间充质干细胞的分离及培养技术 一、实验前准备 实验开始前，将眼科剪刀、眼科镊子、培养皿，15ml 离心管、移液管、移液枪、枪头等放入无菌超净工作台，以紫外线照射 30min。1. 选取 SPF 级，体重 100~150g 左右的SD 大鼠，断颈处死。将大鼠置于体积分数为 75%的乙醇中浸泡 5 min。2. 工作台紫外...