一般饲养细胞在融合前1~2d制备,一只小鼠可取lO7个巨噬细胞。 四、细胞融合与杂交瘤细胞的选择性培养 1.取对数生长的骨髓瘤细胞,1000r/min离心5min,弃上清液.用不*培养液混悬细胞后计数,取所需的细胞数,用不*培养液洗涤2次。 2.同时制备免疫脾细胞悬液,用不*培养液洗涤2次。 3.将骨髓瘤细胞与脾细胞按1:...
骨髓瘤细胞的制备 1.在对数生长期收获107-108的骨髓瘤细胞; 2.200 × g 离心7min,弃上清; 3.轻轻震动试管以松动沉淀,将细胞悬于20ml 培养基A中; 4.200 × g 离心7min,弃上清; 5.细胞悬于10 ml 培养基A中,取适量进行细胞计数; 6.200 × g 离心7min,弃上清; 7.沉淀再悬于10 ml 培养基A中。 通过...
下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。骨髓瘤细胞将特定的OOO(不能在HAT抗原注入◎◎◎培养基上生杂交瘤小鼠长)混合并进细胞分行细胞融→开培养合,转到某些淋巴细胞HAT未融合选育出产(产生特异抗培养基上细胞死亡生高特异体)杂交瘤性抗体的细胞生长细胞(1) 技术是单克隆抗体技术的基础。(2)根据培养基的用途分类,图...
摘要 本发明属于生物医药领域,提供了一种提高骨髓瘤杀伤活性的NK细胞制备方法:NK细胞中加入GSK‑3β抑制剂孵育。本发明提供的提高NK细胞杀伤活性的方法,采用GSK‑3β抑制剂处理,可以增强NK细胞对骨髓瘤细胞的杀伤能力。本发明制备过程简单、可操作性强,为临床医学应用提供了可行的办法。 摘要附图 ...
本发明公开了一种针对多发性骨髓瘤的CARNK细胞制备方法.该方法包括如下步骤:使NK细胞表达融合蛋白,得到针对多发性骨髓瘤的CARNK细胞;所述融合蛋白为将NK细胞表面激活受体CD244的IgG样结构域更换为针对多发性骨髓瘤标志物BCMA的特异性抗体后得到的重组蛋白.所述融合蛋白的氨基酸序列为SEQ ID No.1所示.本发明的技术...
摘要 本发明属于抗体制备与应用领域。具体涉及一种抗骨髓瘤细胞的多克隆抗体及其制备方法与应用。本发明骨髓瘤细胞多克隆抗体是用骨髓瘤细胞免疫动物后制得。本发明骨髓瘤细胞多克隆抗体能用于制备检测或诊断多发性骨髓瘤的试剂中。本发明骨髓瘤细胞多克隆抗体能用于制备治疗多发性骨髓瘤的药物。由于本发明骨髓瘤细胞多克...
小鼠骨髓瘤细胞染色体标本的制备 小鼠骨髓瘤细胞染色体标本的制备 实验目的: 实验目的: 掌握小鼠骨髓细胞染色体的原理和制备方法,识别小鼠染 掌握小鼠骨髓细胞染色体的原理和制备方法,识别小鼠染 色体的数目及特点。 色体的数目及特点。 实验原理: 实验原理: 骨髓细胞具有高度的分裂活性,经秋水仙素或秋水酰胺处 骨髓...
7、一种制备在无血清无脂类培养基中生长的鼠骨髓瘤细胞NSO的方法,包括如下步骤: (1)将鼠骨髓瘤细胞NSO接种于含血清的细胞培养基中进行原代培养; (2)将步骤(1)得到的鼠骨髓瘤细胞NSO进行传代培养,传代培养过程中每代所用的细胞培养基中血清浓度均在前一代培养中所用细胞培养基中血清浓度的基础上进行稀释; (3...
[分析]单克隆抗体制备流程:先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应,之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞;诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合,利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞;进行抗体检测,筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞;进行克隆化培养,即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养;最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
(2)单克隆抗体制备的原理包括:①免疫理:B淋巴细胞能产生特异性抗体;②细胞融合原理:利用病毒对宿主细胞的穿透性使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合;③动物细胞培养技术:对杂交瘤细胞进行体内、体外培养。(3)制备单克隆抗体过程中的几种细胞:①免疫B细胞(浆细胞):能产生单一抗体,但不能无限增殖;②骨髓瘤细胞:能无限增殖...