这是去除非特异性结合的主要方法。将这两种方法放在一起的原因是，通常在确认最佳封闭试剂后，会将其添加到分析缓冲液中。例如，如果1%的酪蛋白封闭效果最佳，那么分析缓冲液中通常也会含有1%的酪蛋白。然而，优化缓冲液还包括增加盐离子浓度、添加去污剂、调节pH等，具体内容见下表。分析物缓冲液中一般加入tween20，...
本文所使用的数据均来自基于赛多利斯Octet非标记分子互作分析系统的生物层干涉技术(BLI)固液反应技术。 一、什么是非特异性结合? 提到非特异性结合,有两个含义:一是固化物与分析物之间的结合,但是这种结合并不是我们期望的。另外一个是指不发生在分析物与固化物质之间的反应。今天我们讨论的是如何消除后者意义上的非...
非特异性结合过高,这是属于不正常的,如果患者还伴随其它不适的症状就应该到医院进行检查,确定非特异性结合过高的原因,然后对症治疗,治疗期间患者一定要放松心情,多注意休息,不要劳累,饮食也要清淡,多喝水,不要吃辛辣刺激性的食物,这都会影响药物的吸收,对治疗不利。
样本的pH值改变可能引发抗体非特异性结合变化。 实验中存在的洗涤剂残留可促使非特异性结合。长时间的孵育过程会增加非特异性结合风险。生物样本中的脂类物质易引起抗体非特异性结合。某些细胞碎片可能造成抗体的非特异性结合。血清中的球蛋白可能参与非特异性结合过程。抗体的储存条件不佳可能导致非特异性结合增多。抗体...
B分析物浓度很高(比如μM蛋白浓度以上),且难以通过优化缓冲液和封闭方法去除非特异性信号的时候,可以尝试使用计算扣除法。 C在实时检测反应中(比如SPR、BLI技术),如果特异性反应的结合解离特点与非特异性反应完全不一样的时候可以计算扣除,比如前者是快解离快结合,后者是慢结合慢解离的时候。
B分析物浓度很高(比如μM蛋白浓度以上),且难以通过优化缓冲液和封闭方法去除非特异性信号的时候,可以尝试使用计算扣除法。 C在实时检测反应中(比如SPR、BLI技术),如果特异性反应的结合解离特点与非特异性反应完全不一样的时候可以计算扣除,比如前者是快解离快结合,后者是慢结合慢解离的时候。
分析物浓度很高(比如μM蛋白浓度以上),且难以通过优化缓冲液和封闭方法去除非特异性信号的时候,可以尝试使用计算扣除法。 C 在实时检测反应中(比如SPR、BLI技术),如果特异性反应的结合解离特点与非特异性反应完全不一样的时候可以计算扣除,比如前者是快解离快结合,后者是慢结合慢解离的时候。
非特异性结合率 非特异性结合率（non-specific binding rate）是2018年全国科学技术名词审定委员会公布的核医学名词，出自《核医学名词》第一版。定义 标记抗体、抗原、配体或受体与非对应抗原、抗体、受体或配体的其他物质间的结合率。一般要求小于5%～10%。出处 《核医学名词》第一版 ...
非特异性抗体结合就是指细胞表面没有特异性抗体结合靶点,却偏偏和抗体结合上了。 非特异性抗体结合的原因有很多。这里主要讲五个。 1、最常见的原因是抗体过量。当抗体浓度太高时,抗体将与亲和力低得多的靶标结合。 解决方案:通过使用滴定,优化抗体浓度,可以解...