摘要:为建立一种检测非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体的间接ELISA(iELISA)方法,对构建的ASFV P30基因表达工程菌诱导表达后,将获取的重组ASFV P30蛋白进行纯化和Western-blot检测,然后以纯化的重组蛋白为抗原,建立了ASFV抗体iELISA检测方法,并进行了特异性、...
间接ELISAp30是非洲猪瘟病毒(Africa swine fever virus,ASFV)感染早期表达的结构蛋白,为非洲猪瘟(ASF)早期诊断和抗体监测的重要靶标.为了建立ASFV ELISA抗体检测方法,本试验以重组p30作为检测抗原,通过方阵滴定法优化抗原包被质量浓度,封闭液以及待检血清和酶标抗体的稀释倍数;确立阴,阳性临界值,检测方法的特异性,敏感性...
非洲猪瘟病毒间接elisa抗体检测方法的建立及其杆状病毒载体疫苗的构建 2. ASFV 间接ELISA抗体检测方法的建立以VP73纯化蛋白作为包被抗原,ASFV标准阳性/阴性血清样品为检测样品,HRP标记的兔抗猪IgG为二抗,建立ASFV间接ELISA抗体检测方法。结果表明,本方法对ASFV标准阳性血清的检测灵敏度可以达到1: 2560;批内和批间重复性试...
用该方法检测购买于中国兽医药品监察所的不同稀释度的ASF标准阳性血清和阴性血清,可见该ELISA方法检测标准阳性血清的最大稀释度为1:512,与INGENASA非洲猪瘟抗体检测试剂盒对比检测180份临床样品,对比可见两种试剂盒总体符合率达97.78%。 使用该方法检测哈尔...
采用建立的间接ELISA 抗体方法对PEDV 、PRRSV 、CSFV 、PRV 、TGEV 、PPV 、PCV 、E.coli 阳性猪血清进行检测，结果显示，除ASFV 阳性对照为阳性外，其他病原阳性血清检测结果均为阴性，该方法特异性强；将非洲猪瘟抗体阳性猪血清2倍倍比稀释（1 100~1 6400）后，利用该方法进行检测，结果显示其检测阳性血清的...
1.10.3 灵敏度试验以优化后的间接ELISA方法为标准,将ASFV阴、阳性血清以1∶800、1∶1600、1∶3200、1∶6400、1∶12 800、1∶25 600稀释后进行检测,依据结果判定能检测到ASFV阳性血清最大稀释倍数,来检验所建立的间接ELISA方法灵敏度。 · 77 · 程 佳等:基于重组EP153R 蛋白的检测非洲猪瘟病毒抗体的间接...
8.如权利要求2‑7任一所述的一种用于非洲猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测的试剂盒的检测方法, 其特征在于, 所述检测方法具体包括以下步骤:(1)将样本稀释液分别与待测样本、 标准阳性对照品、 标准阴性对照品在酶标反应板的样本孔内混合, 并于37℃的避光条件下反应;(2)弃去步骤(1)各孔内的溶液, 用浓缩洗液洗涤,...
5.根据权利要求2所述的非洲猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒,其中,所述Δp54蛋白包被量为8ng/孔,所述pK205R蛋白包被量为8ng/孔。 6.根据权利要求2所述的非洲猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒,其中,所述非洲猪瘟病毒抗原为非洲猪瘟病毒Δp54蛋白,所述Δp54蛋白包被量为10ng/孔;或所述非洲猪瘟病毒抗原为pK205R蛋白,所...
基于重组蛋白pB602L建立的间接ELISA抗体检测方法的研制将重组质粒pCMV-B602L转染至HEK293F细胞中获得高生物活性和高表达量的重组蛋白p B602L,采用Ni亲和层析和凝胶过滤层析两步法制备高纯度目的蛋白.ELISA检测方法因其易于定性定量检测,便于标准化且具有较高的灵敏度,非常适合于猪群健康情况的动态监测和大规模的样本...
这使得ELISA成为一种方便快捷的非洲猪瘟检测方法,即使对于没有太多实验经验的人员也可以进行。第四,ELISA试剂盒可以同时处理多个样本,这对于大规模非洲猪瘟疫情监测和流行病学调查非常有用,可以快速检测大量样本,提高工作效率。最后,ELISA试剂盒相对于其他一些检测方法来说,成本相对较低。这使得ELISA成为一种经济实惠的...