实验原理: (集落)克隆形成实验是测定细胞存活率和考察单个细胞增殖能力的有效方法之一。单个细胞在体外连续6代以上,其后代所组成的细胞群称为克隆或集落,这时每个克隆大小在0.3-1.0mm,含有50个以上的细胞,通过计数克隆形成率,可对单个细胞的增殖潜力做定量分析,常用的手段有两个:平板克隆形成实验和软琼脂克隆形成实验...
1.平板克隆形成实验:主要应用于贴壁生长的细胞类型。在这种实验中,单细胞悬液通过倍比稀释技术进行制备,然后将特定数量的细胞接种到平板上。在经过10到14天的细胞培养后,增殖活性的细胞会增生为独立的细胞集落。每个初始的单细胞能够形成一个集落,通过显微镜下的计数分析,这些集落的数量与最初接种的细胞数量的比率能有...
一周后,当肉眼可见集落形成时,取出6孔板,弃除培养液。每孔加入2毫升甲醇固定30分钟,然后弃除甲醇。接着每孔加入2毫升0.1%结晶紫染色3分钟,清洗掉结晶紫后,用数码相机拍照。在光镜下计数集落数量。 软琼脂集落形成实验:适用于悬浮细胞 🌊 收集对数生长期的细胞,进行活细胞计数,并调整细胞浓度,制成1000活细胞/ml...
实验步骤🔬 细胞处理:取出贴壁率超过90%的细胞(处于对数生长期),进行消化、离心,并重悬细胞进行计数。 种板:将细胞分别种入6孔板中,每组加入1000个细胞,放入CO2培养箱进行培养。 培养:培养1周后,当集落形成时,取出6孔板,弃除培养液。 固定和染色:每孔加入2mL甲醇固定30分钟,然后弃除甲醇。接着每孔加入2mL 0.1...
本次实验采用品牌:Stemcell MethoCult™ 货号:H4435 二、集落类型和图示 • CFU集落一般分为: • 红系细胞集落形成单位(CFU-E)、 • 爆式红细胞集落形成单位(BFU-E)、 • 粒细胞集落形成单位(CFU-G)、 • 巨噬细胞集落形成单位(CFU-M)、 • 粒细胞/巨噬集落形成单位 (CFU-GM) • 混合细...
本文将介绍一种常用的集落形成实验步骤,希望能够对研究者们在动物行为领域的实验设计提供一些参考。 二、实验目的 本实验的目的是观察和分析动物在特定环境下形成集落的过程,了解集落形成的规律和机制。 三、实验材料 1. 动物:选择适合集群行为研究的动物,如小鼠、蚂蚁等; 2. 实验设备:包括动物笼、食物和水源、观察...
2. 步骤一:细胞准备 - 取出贴壁率大于90%的对数生长期细胞,消化离心后,重悬并计数。3. 步骤二:接种与培养 - 实验分组,每个孔中加入1000个细胞,放入CO2培养箱中静待一周。待肉眼可见集落形成,取出6孔板,先用甲醇固定30分钟,再用0.1%结晶紫染色3分钟,洗净后用数码相机拍摄,光镜下精确计数...
实验步骤 需要材料:生长状态良好的细胞、6孔板、结晶紫 ①细胞铺板 6孔板➕2ml培养基 ②正常加药处理细胞(或转染si RNA、过表达基因)48h ③待细胞长满后(消化细胞)PBS清洗细胞,胰酶消化,完全培养基终止消化 ④细胞计数 取出新的6孔板 ⑤计数完,将加药处理后的细胞铺到新的6孔板中,每孔铺1000个细胞 补充培养...
细胞集落形成实验是一种评估细胞增殖能力的重要工具,通过计算集落形成率来确定细胞的生长能力。以下是两种常见实验方法的详细步骤:1. 平板集落形成实验(适合贴壁细胞)首先,确保细胞处于对数生长期,消化离心后,将90%以上贴壁细胞重悬并计数。将细胞分组,每孔接种1000个细胞于6孔板,放入CO2培养箱培养。...
细胞集落形成实验是研究细胞集落形成过程的一种方法,它具有非常重要的意义。 实验方法 细胞集落形成实验是一种简单而有效的实验方法,它可以用来检测细胞的增殖和聚集能力。实验方法如下: 1.首先,准备好需要用到的培养基、细胞和培养皿等实验材料。 2.将细胞接种至培养皿中,放入恒温培养箱中培养。 3.观察细胞的生长...