ELISA间接法是一种常用的酶联免疫吸附实验(Enzyme-Linked immunosorbent assay,ELISA)技术,它主要用于测定未知抗体或抗体效价。以下是对ELISA间接法的详细介绍: 一、原理 ELISA间接法将抗原与固相载体相连结,形成固相抗原。洗涤除去未结合的抗原及杂质后,加入特异性一抗(待测抗体)与固相抗原相结合,形成固相抗原抗体复合...
Lindström和Wager在1978年第一次发表了ELISA间接法的方法,相对于ELISA直接法,它使用酶标记的二抗来进行检测(图2),因为一抗有多个可结合表位,故而提高了检测灵敏度与准确度,就好像在一个黑暗的房间,ELISA直接法只有一个50W的灯泡,而ELISA间接法可以并联上两个50W的灯泡,这样...
间接法ELISA用于测定未知抗体或抗体效价,科学家在1978年第一次发表了间接ELISA检测IgG的方法[6],与直接法不同的是,间接法形成的是三级复合结构,将抗原包被于固相载体中并封闭残存孔隙,加入待检血清,作用一段时间后,再加入酶标抗抗体即酶标二抗,最后加入底物催化酶显色来判定...
间接ELISA法 将抗原结合到固相载体上，形成固相抗原。洗涤去除未结合的抗原和杂质。加入特异性的一抗，使其与固相抗原结合，形成固相抗原-抗体复合物。洗涤去除未结合的一抗。加入酶标二抗，该二抗是针对一抗宿主物种的抗体，可以与结合在固相载体上的一抗结合。洗涤去除未结合的酶标二抗。加入底物，酶催化底物反应，...
间接ELISA的S/P值解读 在间接ELISA中，S代表Sample Signal（样品信号），而P则代表Positive Signal（阳性信号）。S/P值被定义为（样品的OD值减去阴性对照OD均值）再除以（阳性对照OD均值减去阴性对照OD均值）。这个值在间接法ELISA中常被用来表示样品的抗体水平，且其数值越大，通常意味着样品中的抗体含量越高。阻断...
ELISA（酶联免疫吸附测定）根据检测原理和操作流程的不同，主要分为直接法、间接法、夹心法、竞争法等类型。它们的核心区别在于抗体使用方式、检测对象及适用场景。以下是详细对比和解析：一、直接法（Direct ELISA）原理 单抗体系统：直接使用酶标记的特异性抗体（一抗）与样本中的抗原结合，通过酶催化底物显色，吸...
ELISA间接法实验原理是将抗原直接固定在固相载体上，用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量，此一级抗体的特异性非常重要。ELISA间接法实验试剂配制如下：1. 抗原及酶标记抗体 ①抗原： IgG ②酶标抗抗体：羊抗鼠IgG-HRP 2.包被液（CBS）：Na2CO3 0.8g，NaHCO3 1.46g，水溶解，定容500ml。想了解...
间接法的主要实验程序:先用待测的病毒样品包被酶标板,是抗原吸附在微皿孔壁上;洗去多余的抗原及杂物,加入特异性的兔抗血清IgG(一抗);孵育后洗去未和抗原结合的多余抗体,加入酶标羊抗兔IgG(二抗);最后加入底物。如有颜色反应,证明抗原-特异性抗体-酶标二抗复合物的存在,从而确定病毒的存在。(新P151) ①取150ul...
也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 间接法: 包被:用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10uq/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
🔬 ELISA(酶联免疫吸附试验)的间接竞争法是一种常用的免疫分析方法,广泛应用于各种生物标记物的检测。以下是该方法的具体实验步骤:1️⃣ 包被抗体:在微孔板的板底预先包被羊抗兔抗体(二抗),为后续反应提供基础。2️⃣ 加入标准溶液或待检测样品:将标准溶液或待检测样品加入微孔板中,同时加入待检物(目标物...