镍柱(镍离子琼脂糖凝胶4/6FF预装柱)通过其高强度的基质上螯合的金属镍离子,能够选择性地结合多个连续的组氨酸(His)残基。这种柱子主要用于亲和层析纯化含有多聚组氨酸(通常是6个)标签的重组蛋白。▍ 样品准备和预装柱准备 在处理待纯化的样品时,需要确保样品充分溶解,以避免堵塞柱子。可以使用0.45μM的滤膜...
1. 操作安全:镍柱再生过程中有可能会产生有毒气体,必须在通风良好的环境下进行操作;戴上适当的化学防护手套和口罩,以防止酸碱物质对人体造成伤害。 2. 再生时机:镍柱的清洗周期视实际情况而定,一般情况下需要清洗一到两次就可进行再生操作。如果清洗过程中发现镍柱的吸附性能已经明显下降,表明需要进行再生。 3. 清洗...
镍柱再生方法 镍柱NTA树脂再生步骤:(1)从层析柱下端流干所有溶液,用2倍NTA树脂体积的0.2M Acetic Acid/6M guanidine HCl 洗。(2)用2倍体积的去离子水洗。(3)用3倍体积的2% SDS洗。(4)用1倍体积的25%乙醇洗。(5)用1倍体积的50%乙醇洗。(6)用1倍体积的75%乙醇洗。(7)用5倍体积的100%...
每使用五次后需将NI柱再生,清理掉未洗脱下来的蛋白 PS:所有使用溶液均需使用0.45μm的膜过滤 2倍柱体积的6M盐酸胍过柱 2倍去离子水过柱 3倍体积的 2%的SDS(流出的液体会有白色絮状物出现,若其将柱子堵住,则需将柱子重悬后再使用盐酸胍洗涤一遍,再使用SDS洗涤。) 1倍体积的25%乙醇-1倍50%乙醇-1倍75%乙...
在理想状态下,新配制的镍柱再生缓冲液应当是清澈透明的,没有明显的颗粒物或杂质。在这种情况下,使用前无需进行抽滤操作。因为抽滤主要是为了去除溶液中的杂质和颗粒物,以提高溶液的纯净度。如果缓冲液本身已经足够纯净,那么抽滤就不再是必要的步骤。 2. 出现杂质时的处理方式 然而,在某些情况下,由于...
生工生物提供Ni-NTA/Ni-IDA 镍柱再生缓冲液(含 100 mM EDTA)价格,Ni-NTA/Ni-IDA 镍柱再生缓冲液(含 100 mM EDTA)性质,Ni-NTA/Ni-IDA 镍柱再生缓冲液(含 100 mM EDTA)描述,Ni-NTA/Ni-IDA 镍柱再生缓冲液(含 100 mM EDTA)特点,Ni-NTA/Ni-IDA 镍柱再生缓冲液(含 1
镍柱再生乙醇是一种先进的乙醇制备技术,它采用了镍柱催化剂进行反应,可以有效地降低乙醇制备的温度和压力,提高乙醇的产率和选择性。同时,镍柱再生乙醇还能够减少废水和废气的排放,降低生产成本,提高经济效益。 二、镍柱再生乙醇的优势 1.提高乙醇的制备效率 采用镍柱催化剂可以使反应温度和压力降...
不是。镍柱每次纯化后不是都需要再生。镍柱的亲和力和选择性较高,可以在纯化同一种蛋白时重复使用3到5次,而在使用3到5次后,结合效率会有所下降,这时才需要进行再生处理。因此,并不是每次纯化后都需要进行再生,而是根据使用次数和结合效率来判断是否需要再生。
镍柱NTA树脂再生步骤:(1)从层析柱下端流干所有溶液,用2倍NTA树脂体积的0.2MAceticAcid/6MguanidineHCl洗。(2)用2倍体积的去离子水洗。(3)用3倍体积的2%SDS洗。(4)用1倍体积的25%乙醇洗。(5)用1倍体积的50%乙醇洗。(6)用1倍体积的75%乙醇洗。(7)用5倍体积的100%乙醇洗。(8)用1倍体积的75%乙醇洗...
将其储存在20%的乙醇中,放置4℃层析柜中等待再生。 镍柱的再生: 取待再生的镍柱,将其倒入砂芯漏斗中(实验室的滤孔是40uM,大小选择可参考具体的镍柱说明书),滤除20%的乙醇。 加入DDH2O冲洗柱子,V柱子:VH2O=1:5。 加入(50mM Tris ,150mMNaCl ,6M 盐酸胍,0)冲洗柱子,V柱子:V盐酸胍=1:4。