镍离子亲和层析柱是一种常用于蛋白质纯化的技术,其原理主要依赖于金属螯合亲和原理。具体来说,层析柱中填充的是一种结合了镍离子(Ni²⁺)的树脂基质,如Ni-NTA或Ni-IMAC树脂。这些树脂基质上的镍离子通过螯合剂(如NTA或IDA)牢固结合。当带有His标签(即组氨酸标签,通常由6...
一、分子相互作用机制 固相化镍离子通过电子配位与组氨酸残基的咪唑基团形成金属螯合物。这种结合具有pH依赖性,在中性条件下稳定,而在高浓度咪唑或低pH缓冲液中可逆解离。层析柱填料的选择(如IDA或NTA型)会影响结合力强度,需根据目标...
琼脂糖是镍亲和层析介质常用的基质材料之一 。介质上的镍离子通过特定化学方法进行固定化 。合适的镍离子密度对介质性能有着关键影响 。不同粒径的镍亲和层析介质会影响分离效率 。大粒径介质一般传质快但分辨率可能稍低 。小粒径介质分辨率高但柱压可能较高 。 镍亲和层析介质的孔结构影响蛋白质的扩散 。较大孔径...
为了恢复亲和层析柱的性能,需要进行再生处理。具体步骤包括:首先用强变性剂(如6M盐酸胍)冲洗柱子以去除残留的蛋白质;然后用水冲洗干净;接着用0.2%SDS冲洗柱子以去除残留的变性剂;再次用水冲洗干净;之后用50%乙醇冲洗柱子以去除SDS;再次用水冲洗干净;然后用含有Tris和EDTA的缓冲液(如100mM EDTA, 50mM Tris, pH 8...
ph值对镍亲和层析的影响 pH 值影响镍亲和层析中蛋白质与镍离子的结合亲和力。不同的 pH 条件会改变镍亲和层析的选择性。pH 过高可能导致蛋白质变性，影响层析效果。较低的 pH 值有时能增强蛋白质在镍亲和层析中的吸附。pH 影响镍亲和层析柱的平衡状态。恰当的 pH 有助于提高镍亲和层析的分辨率。pH 值变化会...
镍亲和层析填料/Ni-CrystaroseC FF 西安齐岳厂家 西安齐岳生物科技有限公司是集化学科研和定制与一体的高科技化学公司。业务范围包括化学试剂和产品的研发、生产、销售等。涉及产品为通用试剂的分销、非通用试剂的定制与研发,涵盖生物科技、精细化学品、医药中间体和化工材料等领域。公司重视人才、尊重人才,努力实施科技...
镍离子金属鳌合亲和层析介质(Ni-NTA)说明书 一、简介 金属螯合亲和层析介质,又称固定金属离子亲和色谱,其原理是利用蛋白质表面的一些氨 2+2+2+2+3+ 基酸,如组氨酸能与多种过渡金属离子如Cu,Zn,Ni,Co,Fe发生特殊的相互作用,能 够吸附富含这类氨基酸的蛋白质,从而达到分离纯化的目的。因此,偶联这些金属离子的...
一般来说,镍亲和层析缓冲液的配方包括以下几个关键组分: 1.缓冲剂:用于调节溶液的pH值,常见的缓冲剂包括Tris-HCl、Phosphate、HEPES等,选择缓冲剂的pH值要根据目标蛋白质的稳定性和层析条件来确定。 2.盐类:用于调节溶液的离子强度,常见的盐类包括NaCl、KCl等,选择盐类的浓度要根据层析柱填料的特性和实验条件来确定...
在某些情况下,填料中可能含有镍离子等杂质,这会影响层析效果和产品质量。因此,探索有效的脱镍处理方法显得尤为重要。 一、物理法脱镍 物理法主要是通过物理手段来去除填料中的镍离子。常用的方法包括: 1. 离子交换:利用特定的离子交换树脂,通过树脂上的功能基团与填料中的镍离子进行交...
www.purify.org.cn 镍镍离离子子金金属属螯螯合合亲亲和和层层析析介介质质使使用用说说明明书书( ( 完完全全版版) ) 一、 简介 金属螯合亲和层析, 又称固定金属离子亲和色谱, 其纯化原理是利用蛋白质表面的组氨酸与多种过渡金属离子如Cu配位相互作用, 从而能够吸附富含这类氨基酸的蛋2+, Zn2+, Ni2+, ...