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近日,陆军军医大学西南医院检验科陈鸣教授团队在材料科学领域顶级期刊《ACS nano》(IF 17.1)上发表了以《末端双茎环锁式探针:一种提高滚环扩增检测循环miRNAs性能的通用策略》为题的论文,提出改变锁式探针结构可同时提高核酸标志物检测特异性...
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锁式探针技术是指带有5’-PO4基团的ssDNA(single-stranded DNA)以首尾相连的方式特异性地结合到与其互补的靶基因序列上,在连接酶的作用下成环。该技术可应用于环状单链DNA(circular single-stranded DNA,cssDNA)的生产。另外,锁式探针结合滚环扩增技术可应用于分子生物学及医疗领域,如植物病毒分型检测、病原菌检测...
1.本发明涉及生物检测技术领域,具体涉及一种基于锁式探针介导的茎环连接的扩增技术,通过组合锁式探针和茎环引物,通过连接反应和扩增反应两步法从而检测双链dna点突变,适合特异性点突变的检测。 背景技术: 2.点突变是基因突变的一种主要形式,特定点突变常会引起蛋白编码的错误,从而翻译出错误的蛋白质,这在某些疾病和...
本发明公开了一种基于锁式探针介导的茎环连接的扩增技术检测DNA点突变的方法及试剂盒。本方法首先将锁式探针和DNA模板连接形成带有茎环结构的长串联重复序列片段,然后将该产物和茎环引物、滚环引物、等温扩增引物混合在一起,构造双茎环扩增元件进行指数扩增,达到信号的指数放大。其中,锁式探针包括正常型锁式探针和突变...
滚环扩增技术的原理如图所示:两侧含有待扩增核酸的线性单链模板,在锁环探针和DNA 连接酶的帮助下,两端靠近并连接成环状成扩增模板。phi29 DNA 聚合酶催化子链合成的过程中,当遇到双链结构时可使双链分开,并继续子链的延伸,最终形成一条由数个重复序列串联而成的单链DNA。下列说法正确的是() ...
本发明所述方法针对单链靶基因设计锁式探针以及blocker探针,然后使用DNA连接酶进行连接,连接后加入外切酶去除未连接的锁式探针,获得单链环状DNA。本发明利用Blocker探针介导的锁式探针技术生成环状DNA(cssDNA)及用于检测单位点变异,本发明提供的方法可以提高cssDNA的产量,减少多聚物的生成,同时该方法可以进行高特异性高...
锁式探针滚环扩增方法在小鼠F9单细胞基因表达研究中的应用 RCA是一系列反应的整合,首先,利用特异的锁核酸(Locked nucleic acid,LNA)与mRNA结合,可在细胞内原位将mRNA反转录成cDNA,通过RNase H将mRNA降解的同时,锁式探针(... 杜洪震 - 北京协和医学院(中国医学科学院) 北京协和医学院 清华大学医学部 中国医学科学...