一、铺完细胞后状态不佳 二、细胞密度不均匀 三、细胞形态异常或死亡、凋亡 03 小结 产品推荐 参考文献: 细胞铺板是细胞实验的第一步,将细胞铺得均匀、密度适宜是对于确保实验结果的准确性、可重复性和可信服性具有不可替代的作用。接下来随小 M 一起看看细胞铺板有哪些秘密诀窍呢~ 细胞铺板是细胞生物实验起始的...
其实细胞铺板不一定都需要单个单个的那么均匀，比如做免疫荧光时，就可以选择铺中间少，周围稍多的板子。而在提取蛋白或者提取RNA的时候有时会选择铺中间多，四周少的板子，因为有些细胞刮刀不好用，没有办法刮到周围的。特别说明一下：这里的多也只是相对于多，细胞也是单层的。常见问题解答 （1）细胞铺板后，细胞...
1. 选择细胞:根据实验需求选择生长速度、形态、特性等合适的细胞系或提取原代细胞。 2. 观察细胞状态:将细胞放置在显微镜下观察其生长状态及密度。以贴壁细胞为例,若培养基澄清透明且无漂浮杂质,当细胞生长至 80-90% 密度且状态良好时,则可以进行细胞传代或铺板。 图2. 生长至 80-90% 密度的 HepG2 细胞。 3...
对于6孔板、12孔板或24孔板,为防止表面张力导致的中间液面太低细胞聚集的现象。通常每孔首先滴加少量培基,轻轻晃动浸润整个孔底以保证板子的孔底都是湿润的,这样加液后细胞悬液会平铺在整个孔底,可以避免加在中间位置和加在周边晃匀后周边细胞局部太多的现象,细胞分散会较均匀。注意加完细胞悬液后要放工作台静置...
细胞铺板实验 一、 准备工作 1. 实验材料:细胞培养皿,细胞计数仪,完全培养基,PBS,胰酶,移液枪及枪头等。 小贴士:完全培养基一般是由无血清培养基+胎牛血清 (FBS) +青霉素/链霉素双抗组成。 2. 无菌环境:实验开始前对实验材料进行清洁并无菌处理,如紫外照射。
单细胞铺板是将细胞培养板的每个孔中预先加入适量完全培养基,充分晃动使培养基浸润整个孔底,随后滴加重悬好的细胞悬液,充分摇晃混匀,将细胞分散,不抱团也不过分空荡。 材料与仪器 DMEM 培养基、无菌 PBS、0.25% 胰蛋白酶 移液器、无菌枪头、无菌 EP 管、6 孔细胞培养板、细胞计数板 步骤 (1)细胞培养一段时...
其实细胞铺板不一定都需要单个单个的那么均匀，比如，做免疫荧光时可以铺中间少，周围稍多的板子，同时...
细胞铺板是细胞实验中常见又必须的实验操作,在细胞计数、培养、免疫荧光等实验操作中必不可少。主要是根据实验目的将一定浓度的细胞稀释液无污染地接种到细胞计数板中,方便进行下一步操作。 用途 用于细胞计数、迁移、侵袭实验等。 材料与仪器 75% 的酒精、酒精棉球、超净台、倒置显微镜、酒精灯、移液枪、枪头、PB...
96孔板/384孔铺板时步骤与上述基本一致,只是多使用排枪,即不用摇匀。 96孔板/384孔板(来自Thermo Fisher) 注意事项: 用排枪吸取时,一定要保证每个枪头吸上来的悬液体积一致; 铺96孔板时,如果是用于进行MTS等长时间测试时,最外圈应空余出来,不接细胞,加入一圈PBS或多于细胞悬液,以防止培养基蒸发引起的边缘效应; ...
一般在提取蛋白或者提取RNA的时候有时会这样铺板,因为有些细胞刮刀不好用,没有办法刮到周围的,想要铺中间多,周围少的板子,手法如下: 1、细胞板子不需要提前润洗,从中间滴入进去后; 2、把板子朝一个方向顺时针或者逆时针旋转3-5圈; 3、水平台上静置2-5min; ...