1. 将经酶切和测序鉴定正确的重组质粒(pGEX-3X + PER, 表达出融合蛋白GST +PERc134个氨基酸,分子量为26kD + 15kD = 41kD)转入合适的大肠杆菌中。 2. 划线接种于LB琼脂+合适的抗菌素(氨苄青霉素,终浓度100μg/ml)的平皿,挑单个菌落,接种于LB+氨苄 2-5ml, 37oC摇过夜。 以上已事先准备好。 以下为本...
在293细胞中大量扩增腺病毒,一旦重组病毒已被纯化和鉴定,即可在293细胞中进行大量扩增。对于蛋白表达,则根据需要可在任何一步扩增步骤中停止,离心沉淀细胞后按照适当的操作方法进行蛋白抽提(根据蛋白类型的不同抽提上清或细胞沉淀)。为优化时间进程,每个感染周期必须与下一次细胞扩增培养同步。如果由于各种原因不能同步,则...