实验流程 实验流程:: 第一天 第一天8AM-5PM8AM-5PM (重组载体构建) (重组载体构建) rhIL-18基因的 PCR产物 载体质粒pUC18 BglⅡ和PstⅠ 双酶切 BamHⅠ和PstⅠ 双酶切 浓度1% 琼脂糖凝胶电泳 凝胶回收纯 化 电泳检验 T4连接酶连接过夜 配制LB液体与固体平板培养 基 灭菌 37℃过夜培养TOP10菌株 溶液回收纯 ...
重组人白介素-18(rhIL-18)基因工程菌的构建 分子生物学实验-实验操作 基因、载体、受体菌株 实验技术要求 应掌握的实验技术 酶切,连接 凝胶回收 制备感受态细胞 质粒提取 PCR 琼脂糖凝胶电泳 考察指标 电泳、蓝白斑数量 电泳 感受态细胞转化率 电泳 电泳 电泳 实验流程: 第一天 8AM-5PM (重组载体构建) 实验流程...
质粒DNA不仅能在细菌中复制,并且在添加真核复制信号和启动子后,可以构建出能在原核和真核细胞中均可复制的穿梭质粒,并在真核细胞中表达,因此这类载体在基因工程中应用广泛。 (二)质粒的拷贝数与不亲和性 质粒的拷贝数是指某种质粒在一个细菌细胞内的数目。 根据每个寄主细胞中质粒拷贝数的多少,把质粒分为严紧型...
重组人白介素-18(rhIL-18)基因工程菌的构建 基因、载体、受体菌株 基因PCR 酶切连接 质粒 质粒提取 载体转化 菌株 实验技术要求 ❖应掌握的实验技术 ▪酶切,连接▪凝胶回收▪制备感受态细胞▪质粒提取▪PCR▪琼脂糖凝胶电泳 ❖考察指标 ▪电泳、蓝白斑数量▪电泳▪感受态细胞转化率▪电泳▪电泳...
重组人白介素-18(rhIL-18)基因工程菌的构建 基因、载体、受体菌株 基因PCR 酶切连接 质粒 质粒提取 载体转化 菌株 实验技术要求 ❖应掌握的实验技术 ▪酶切,连接▪凝胶回收▪制备感受态细胞▪质粒提取▪PCR▪琼脂糖凝胶电泳 ❖考察指标 ▪电泳、蓝白斑数量▪电泳▪感受态细胞转化率▪电泳▪电泳...