酿酒酵母表达系统-半乳糖诱导外源蛋白表达实验 培养基: SC尿嘧啶缺陷培养基(2%GLucose) SC诱导培养基(2%半乳糖) 贮存液: 20%葡萄糖(W/V) 20%半乳糖(W/V) 贮存液过滤除菌,4℃保存。 SC培养基高温高压灭菌,待培养基温度降低至60℃以下后,加入相应体积的葡萄糖或者半乳糖,混匀,4℃保存备用。 实验流程: 1....
菌物系统一,协,酿酒酵母脚半乳糖可诱导表达系统特性的研究刘巍峰高东王祖农山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室济南摘要把大肠杆菌一半乳糖昔酶基因克隆到带有酵母半乳糖可诱导启动子的穿梭表达质粒中,并把得到的重组质粒分别转化到两种不同遗传性状的宿主菌中,其中一株菌为蛋白酶活性缺失以上的时一突变菌株...
酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)半乳糖可诱导表达系统特性的研究,酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)半乳糖可诱导表达系统特性的研究表达,系统,酵母,酿酒酵母,特性的研究,半 乳糖,表达系统,特性研究,低聚半乳糖,半乳糖血症,表达,系统,酵母,酿酒酵母,特性的研究,半,乳糖,表达系统,特性研究,低聚半乳糖 ...
( 山东 大学 生命 科学学院微 生 物技术 国家 重 点实 验室济南2 5 0 1 0 0 )摘要 把大 肠杆菌 p 一 半乳糖 昔酶基因克隆到带有 酵母 半 乳糖 可诱导启动子C A IL 的 穿梭 表达 质粒Y PE S Z中,并把得到的重 组质粒分别 转化到两种不 同遗 传性 状 的宿 主菌中,其 中一 株菌为 蛋白...
常用的诱导物质包括甘露醇、半乳糖或加入氮源限制。培养和收获：在诱导后的一段时间内，对诱导后的酵母细胞进行培养。培养时间可以根据目标蛋白质的表达水平和酿酒酵母的生长特性进行优化。最后，收获酵母细胞，通常通过离心和细胞破碎等方法。蛋白质分离和纯化：对酿酒酵母中表达的目标蛋白质进行分离和纯化。常用的方法包括...
半乳糖诱导(GAL)系统包括GAL启动子及其调控网络,是酿酒酵母中应用最广泛的诱导系统。GAL启动子需要被转录激活因子GAL4激活,而GAL4的表达和活性受到GAL80和Snf1信号通路的调节。GAL系统的调控相当严格,在葡萄糖的存在下受到强烈抑制,而在半乳糖的存在下,它们的激活强度大大增加。为了不在发酵中不断补加半乳糖,一般都会...
把大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因克隆到带有酵母半乳糖可诱导启动子GAL1的穿梭表达质粒pYESZ中,并把得到的重组质粒分别转化到两种不同遗传性状的宿主菌中,其中一株菌为蛋白酶活性缺失90%以上的pep4-3突变菌株.通过比较两株重组菌产生的β-半乳糖苷酶活性水平发现在所述实验条件下,蛋白酶缺失突变菌株中产生的β-卜半...
酿酒酵母表达系统-半乳糖诱导外源蛋白表达实验 培养基: SC尿嘧啶缺陷培养基(2%GLucose) SC诱导培养基(2%半乳糖) 贮存液: 20%葡萄糖(W/V) 20%半乳糖(W/V) 贮存液过滤除菌,4℃保存。 SC培养基高温高压灭菌,待培养基温度降低至60℃以下后,加入相应体积的葡萄糖或者半乳糖,混匀,4℃保存备用。 实验流程: 1....
酿酒酵母表达系统-半乳糖诱导外源蛋白表达实验 培养基: sc尿嘧啶缺陷培养基(2%glucose)sc诱导培养基(2%半乳糖) 储藏液: 20%葡萄糖(w/v)20%半乳糖(w/v)贮存液过滤除菌,4℃保存。 sc培养基高温高压杀菌,等待培养基温度减少至60℃以下后,重新加入适当体积的葡萄糖或者半乳糖,搅匀,4℃留存水泵。 实验流程: 1....
摘要以α-半乳糖苷酶基因为筛选标记,构建GAL1诱导型启动子介导的酿酒酵母表达载体YGM-α-gal质粒,将枯草芽孢杆菌的β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因克隆到此载体中,构建质粒YGMPA-α-gal,转化宿主酵母后,实现β-1,3-1,4-葡聚糖酶在酿酒酵母中的分泌表达.结果表明:在2%半乳糖诱导下,摇瓶发酵24h后分泌表达的β-...