减少反应步骤与酶的使用量。酶法加帽改成共转录原因是，与酶法加帽相比，共转录法可以最大限度地减少反应步骤与酶的使用量。成熟的mRNA需要一个5’帽子结构，以保证基因表达和mRNA的稳定性，共转录法在体外转录上，可使样品体外转录后得到5mg/ml，有94%的5’-cap1结构。
1.按照预定的比例和浓度,准确称量或量取RNA底物、加帽酶、GTP等,加入到合适的容器中。 2.加入适量的缓冲液,以维持适宜的反应环境,如酸碱度、离子强度等。 3.充分混匀反应体系,可使用振荡器或移液器轻轻吹打,确保各成分均匀分布。 三、酶促反应阶段。 这是酶法加帽的核心环节。 1.将配制好的反应体系转移至...
mRNA帽类似物 在mRNA研发和生产工艺中,加帽工艺有两种,一是传统的酶法加帽,二是共转录法,共转录法收率更高,杂质更少,但是需要使用到帽类似物,目前价格昂贵! mRNA帽类似物的最新发展突显了mRNA作为研究RNA代谢的有力工具的重要性,并发现了靶向mRNA的潜力,可用于治疗癌症,基因疗法,抗病毒疗法和改善核酸酶靶向药物的...