1. 挑去单克隆GS115于50 mL YPD培养基中，30℃过夜。2. 取500 ul 菌液加入到500 ML YPD培养基...
(2)锄感琐态 GS115笔胞憎 12 000 rpmin凤煌 15 s, 瘾场玲 LiCl; (3)捌俗福隅纽掩入 240μL眷500 g/L PEG-3350、36μL的 1 mol/L LiCl、25μL归辣 DNA及 50μL线搔扁灵瘫 DNA(5-10μg), 堆涡器甜合铅植酵盾莫丈 1 min,使嘉坚胆割腊秦盲橱撩芬颁采混追; (4)液 30℃厘蓄 30...
先确定培养基，活化就在平板上涂布，挑单菌落，液体培养到对数期，15-20%的甘油（500 ul 30-40%的...
28(6):1367—1372.奶牛13-1,4一半乳糖基转移酶基因在毕赤酵母GSll5中的转化表达及发酵优化姚晶,吴正钧,任婧(1.乳业生物技术国家重点实验室,光明乳业股份有限公司技术中心,上海200436;2.上海海洋大学食品学院,上海201306)摘要:采用电转化法将已构建好的表达载体pPIC9K—GT转化到毕赤酵母(Pichinapastoris)GS115中。
GS115是毕赤酵母菌株,属于真核细胞。一般的针对原核生物的抗生素例如卡那和氨苄对酵母是无效的,因此为了防止大肠杆菌等原核生物对酵母培养菌株污染,往往会在培养基中加入一些氨苄和卡那霉素的抗生素,来抑制细菌菌的污染和生长。GS115毕赤酵母自身表型为Mut+,但是GS115转化株既能够产生出Mut+菌株,也能够产生出Muts菌...
我现在做酵母表达,我所要表达的蛋白来源于酿酒酵母,理论上不应该对毕赤酵母产生毒性,应该可以在GS115中表达。我用pPIC9K的质粒,连接上以后测序结果正确,用自己的引物PCR反应后可以得到大小正确的条带,但是诱导后没有表达。后来我用5‘AOX于3’AOX的引物扩增,所得到的条带于表达手册上给的标准不一致,我找不到原...
质粒浓度4509ng/ul 转化到gs115 浓度够了吗 发自小木虫IOS客户端
酵母是GS115，载体pPIC9K，构建成功后有11KB。SacI线性化。电转化后涂MD板上2-3天会长出很多，但是...
问题1，GS115能不能用化学转化方法，用氯化锂处理细胞制成感受态，然后用鲑精NDA 试剂进行转化 2，我...