X-Gal是E.coliβ-半乳糖苷酶（LacZ）的反应底物，而X-α-Gal是酵母α-半乳糖甘酶（MEL1）的反应底物。X-α-Gal检测酵母MEL1基因的激活。MEL1是Gal4酵母双杂交系统的一个报告基因，编码分泌α-半乳糖苷酶。该酶可水解无色的X-α-Gal底物并最终产生蓝色底物。表达α-半乳糖苷酶的酵母菌落在含有X-α-Gal...
X-Gal是β-半乳糖苷酶(LacZ)的反应底物,在β-半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物,常需要配合IPTG使用用于蓝白斑筛选。而X-α-gal是酵母α-半乳糖苷酶(MEL1)的反应底物。X-α-gal用作酵母双杂交系统中蓝白筛选的筛选标记。二者不可以互相替换。 翌圣生物推出的X-α-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半...
因此,这种相互作用可直接通过将酵母菌接种在缺乏组氨酸的选择性培养基上生长,再进行X- gal检测β -半乳糖苷酶的表达来确定(见图1)。 在这里,我们阐述了膜蛋白与可溶性蛋白质或者是两种膜蛋白之间相互作用的在体检测方法。 一个跨膜诱饵蛋白X被融合到一个紧跟Cub结构城相连的人工转录因子之后,从而形成-种蛋白质X ...
英文名:X-α-gal Solution(20mg/ml)储存条件:-20 产品说明: X-α-Gal(5-溴-4-氯-3-吲哚基-α-D-吡喃半乳糖苷)是α-半乳糖苷酶(MEL1)的显色反应底物,更为常见的X-Gal是β-半乳糖苷酶(LacZ)的显色反应底物。α-半乳糖苷酶可水解无色的X-α-Gal底物,并生成蓝色的产物。通过肉眼可见的蓝白斑筛选...
几乎所有酵母杂交的实验中,均使用DMF溶解X-α-gal。X-α-gal也溶解于甲醇和DMSO。经过验证酵母杂交的实验中DMSO可以用于X-α-gal的配制与稀释。但DMSO熔点高,使用不便。甲醇还未经验证。 11.杂交效率不高,怎么办? 效率不高,可能是杂交细胞数量不够,适当增加诱饵蛋白的液体培养量,保证有足够的细胞数量。可以延长...
X-α-Gal与酵母双杂交系统: 酵母双杂交筛选是体内用来检测蛋白-蛋白相互作用的一种遗传分析实验,此方法由Prof. Stan Fields及合作者开发用来调查两个已知蛋白的相互作用,另一个重要应用是从文库内筛选并鉴定某一特定蛋白的未知结合蛋白。阳性克隆也就是那些能够激活报告基因转录子,使得营养缺陷型酵母双杂交菌株在营养...
酵母双杂交用X-gal显色要注意哪些事啊!10 423244/1 返回列表 查看: 4778 | 回复: 9 只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏 在APP中查看 【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 天际雾影 的 4 个金币,回帖就立即获得 2 个金币,每人有 10 次机会 相关版块跳转 生物科学 我...
几乎所有酵母杂交的实验中,均使用DMF溶解X-α-gal。X-α-gal也溶解于甲醇和DMSO。经过验证酵母杂交的实验中DMSO可以用于X-α-gal的配制与稀释。但DMSO熔点高,使用不便。甲醇还未经验证。 11.杂交效率不高,怎么办? 效率不高,可能是杂交细胞数量不够,适当增加诱饵蛋白的液体培养量,保证有足够的细胞数量。可以延长...
互作验证：酵母双杂交载体转板于SD/Gal/Raf/-His/-Trp/-Ura/-Leu/X-Gal诱导显色缺陷板上进行检测...
X-gal 溶液: X-GAL溶解于DMF〔二甲基甲酰胺〕中至浓度为20mg/ml.,–20°C避光保存 Z buffer/X-gal 溶液: 100 mlZbuffer 0.27 mlβ-mercaptoethanol〔β-巯基乙醇〕 1.67 mlX-gal贮存液 ONPG 溶液:〔即配即用〕 ONPG溶于Zbuffer中,终浓度4 mg/ml,调PH至7.0. 留意: 1.ONPG须要1～2h才能溶解 2.每次...