(2)酵母双杂交系统。①基本原理:运用基因重组技术把编码已知蛋白的DNA序列连接到带有酵母转录调控因子(常为GAL1、GAI4或GCNI)DNA结合结构域编码区(BD)的表达载体上;导人酵母细胞中使之表达带有DNA结合结构域的杂合蛋白,与报告基因上游的启动调控区相结合,准备作为“诱饵”捕获与已知蛋白相互作用的基因产物,若将已知...
答:基本原理:酵母的转录活化因子 GLA4含有两个功能结构域:氨基端的 DNA结合结 构域(BD)和羧基端的转录激活结构域(AD)。它们彼此分开时,各自仍具有各自的功 能。 Fields 根据此特征设计了双杂交系统。 构建过程:构建两个重组质粒:一个表达 BD,另一个表达AD。如果在BD基因上再接上 一个蛋白X基因,在AD基因上...
【答案】：(1)基本原理：真核生物的转录因子大多是由两个结构上分开、功能上独立的结构域组成的。如GAL4的N端1～147氨基酸是DNA结合域(BD)，其C端768～881氨基酸是转录激活域(AD)。一般情况下，AD能与GAL4效应基因启动子上游的特定DNA区段(uAS)相结合，AD则推动了转录起始。若用基因工程的方法，...
酵母双杂交系统（yeast two-hybrid system）是在酵母体内分析蛋白质-蛋白质相互作用的基因系统，也是一个基于转录因子模块结构的遗传学方法。该方法建立以来，经过不断的完善和发展，不但可以检测已知蛋白质之间的相互作用，更重要的在于发现新的与已知蛋白相互作用的未知蛋白....
百度试题 题目12.简述酵母单、双杂交系统的基本原理与应用, 相关知识点: 试题来源: 解析
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(2)酵母双杂交系统 基本原理:运用基因重组技术把编码已知蛋白的DNA序列连接到带有酵母转录调控因子(常为GAL1、GAL4、GCN1)DNA结合结构域或编码区(BD)的表达载体上;导入酵母细胞中使之表达带有DNA结合结构域的杂合蛋白,与报告基因上游的启动调控区相结合,准备作为“诱饵”捕获与已知蛋白相互作用的基因产物。若将已知...
如果在bd上接上一个蛋白x在ad上接一个蛋白y再将这二个质粒共同导入酵母菌中若xy蛋白在酵母内发生交互作用则相当于将gal4的bd和ad又连在一起即可以转录激活下游报告基因的表达通过测定报告基因的产物及活性来检测这种交互作用的发生 酵母双杂交系统检测相互作用原理基本流程及注意事项 基本原理 酵母双杂交系统由...
基本原理 酵母双杂交系统由Fields和Song等首先在研究真核基因转录调控中建立 i 。典型的真核生长转 录因子, 如GAL4、GCN4、等都含有二个不同的结构域: DNA结合结构域(DNA-binding domain)和转录激活结构域(transcription-activating domain)。前者可识别DNA上的特异序列, 并使转录激活结构域定位于所调节的基因的上...