酶活测定目的 建立标准的酵母双杂交系统报告基因表达的β-半乳糖苷酶活性测定方法.方法 采用o-硝基-β-D-半乳糖苷(ONPG)为底物,以液氮反复冻融破碎酵母细胞壁,通过比较不同测定时间,接种阳性克隆数目,转化方法以及酵母株对β-半乳糖苷酶酶活的影响,确定最佳酶活测定条件. 结果相同条件下,单个克隆之间的酶...
本文通过对酵母双杂交系统中诱导的Ｂ一半乳糖苷酶活性测定方法多种影响因素的系统考察，拟将Ｂ一半乳糖苷酶这一报告基因的酶活测定方法标准化，为相关研究人员提供参考。１材料与方法 １．１材料采用基于ＧＡｌＡ的酵母双杂交系统３（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）为操作平台，包括ＡＤ、ＢＤ空载体，构建完毕的ＳＶ４０Ｔ抗原...