百度试题 结果1 题目简述酚氯仿抽提法提取DNA的原理。相关知识点: 试题来源: 解析 酚氯仿抽提法提取DNA的原理是利用酚和氯仿破坏细胞膜和核膜,使核酸释放到溶液中,同时酚和氯仿能够沉淀蛋白质,从而实现核酸与蛋白质的分离。反馈 收藏
其原理是基于酚在酸性条件下具有与DNA高度亲和性的特点,可以将DNA从细胞溶液中抽提出来。 具体的步骤如下: 1.细胞溶解:首先将待提取DNA的细胞样品加入适量的细胞裂解缓冲液中,通过机械或化学方法使细胞壁破裂,释放出细胞内的DNA。 2.酚抽提:加入相同体积的酚溶液,并进行充分混合。酚能与DNA形成复合物,并与其他...
一、酚/氯仿抽提原理与各试剂的作用 基本原理:有机溶剂会使杂质蛋白变性,并将杂质蛋白留在有机溶剂层,而DNA分子是有水溶性的,所以会进入水溶液层,这样DNA和杂质蛋白就被分开了。 苯酚:使蛋白质变性,同时抑制了DNase的降解作用。用苯酚处理时,由于蛋白与DNA联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相...
总结来说,酚氯仿法利用酚氯仿溶液破坏细胞膜和核膜,将DNA从细胞中释放出来。离心分离蛋白质和DNA,然后通过酒精沉淀和乙醇洗涤纯化提取的DNA。这种方法简单快速,并且能够获得较纯的DNA样品。不过,酚氯仿法在提取DNA时会同时提取到RNA和蛋白质,因此在一些需要高纯度DNA的实验中可能不适用。在使用酚氯仿法提取DNA时,还需...
最后用氯仿抽提:去除核酸溶液中的迹量酚。(酚易溶于氯仿中) 用酚-氯仿抽提细胞基因组DNA时,通常要在酚-氯仿中加少许异戊醇,为什么? 异戊醇:减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。异戊醇可以降低表面张力,从而减少气泡产生。另外,异戊醇有助于分相,使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相...
【答案】:处理方法:先用酚抽提,然后用酚/氯仿抽提,最后用氯仿抽提。原理:酚虽能有效地使蛋白质变性,却不能完全抑制RNA酶的活性,它还能溶解带有长poly(A)尾的RNA分子。使用两种不同的有机溶剂去除蛋白质比用单一有机溶剂效果更好。继而用氯仿抽提可除去核酸制品中残留的少量酚。
溴氯仿法提取DNA的原理:用酚抽提细胞DNA时,有什么作用?使蛋白质变性,同时抑制了D Nase的降解作用。用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与D NA联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA 溶于水相...
苯酚氯仿抽提法 原理:苯酚可以使蛋白质变性使蛋白质与DNA之间的联结键断裂(同时还可以抑制DNase对DNA的降解),在SDS、蛋白酶K及EDTA等的存在下裂解细胞膜、变性降解核蛋白,使DNA从核蛋白中释放游离出来,再利用苯酚易溶于氯仿的特点以及DNA易溶于水,却不溶于有机溶剂的特点,加入氯仿促进有机相与液相分离,通过离心...
溴氯仿法提取 dna 的原理 : 用酚抽提细胞 dna 时,有什么作用 , 使蛋白质变性,同时抑制了dnase的降解作用。用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与 dna 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而dna 溶于水相。使用酚的优点 :1. 有效变性蛋白质 ;2. 抑制了 dnase的降解作用...