相关知识点: 试题来源: 解析 退火温度:PCR反应中引物与模板结合的温度,通常有引物的解链温度TM减去1-2°C; 解链温度(TM):使正确的碱基配对杂交结构相互分开的温度,TM值通常可以由公式计算所得: Tm=〔4×(G+C)+2×(A+T)〕°C 反馈 收藏
1.退火温度=4×(G+C)+2×(A+T)-(5～8) 只是粗算,有时不灵,但比较简便.2.用primer5(or oligo6)计算,引物配对好后,primer5可以显示Tm,我认为这个值就是退火温度,我的经验再加2 or 3度最好.3.合成引物的单子上也有个Tm,减去5～8也可,但有些公司提供的Tm就是方法1计算的.我认为方法二最准确,...
图3. 使用含共稳定组分的缓冲液(使用 60℃ 通用退火温度),引物与模板的结合示意图。即使引物的 Tm 与 60℃ 通用退火温度不同,该共稳定组分也可以使引物与 DNA 模板发生特异性结合。 图4. 使用 60℃ 通用退火温度进行高特异性和高产率 PCR 扩增。使用 Platinum SuperFi II DNA 聚合酶和一系列具有不同退火温...
完全退火温度通常根据材料的Ac3温度(即奥氏体开始转变温度)来确定,一般为Ac3+(30-50℃)。对于某些特殊材料,如亚共析钢,为了消除粗大魏氏组织,奥氏体化温度甚至可能提高到1100-1200℃。 三、影响退火温度选择的其他因素 除了焊接件的材料和产品要求外,还有一些其他因素可能影响退火温度的选择。例如,...
退火处理是将塑料件置于一定温度的加热环境中,静置一段时间后缓慢冷却的过程。退火温度的选择至关重要,它直接影响退火效果。一般来说,塑料件的退火处理温度在60℃到120℃之间。但具体温度应根据塑料件的材料种类和厚度来确定。 例...
退火温度是指在进行PCR等分子生物学实验时，引物和模板结合的温度参数。其通常设定为比引物的Tm值低5℃，以增加引物与模板结合的可能性。在模板变性后，温度需快速冷却至40℃～60℃（特定的退火温度），此时引物与模板即可形成稳定结合。退火温度的选择对于实验结果具有重要影响。设定过高的退火温度，可能...
1. GC含量与退火温度之间的关系在于氢键的稳定性。由于GC碱基对之间形成了三个氢键，而AT碱基对只有两个氢键，因此GC含量的增加意味着需要更多的能量来断裂这些氢键。2. 较高的GC含量导致了对更高退火温度需求的增加，因为只有通过提高温度，才能提供足够的热能来打开氢键，使得DNA双链得以分离。3. 退火...
3. 软件预测:可以使用PCR退火温度预测软件,如Primer3,根据引物序列预测合适的佳的退火温度。这些软件通常会提供退火温度的预测值和温度范围,帮助实验者选择合适的退火温度。 4. 使用梯度PCR仪:在预实验中,可以使用梯度PCR技术,在一定的温度范围内进行扩增,观察不同温度下的扩增产物。通过比较不同温度下的扩增产物,可...
铁件的退火温度主要受以下几个因素影响: 1. 碳含量:生铁等高碳铁件的退火温度通常较高,而低碳钢等低碳铁件的退火温度则相对较低。 2. 合金元素:铁件中加入的合金元素也会影响退火温度。例如,不锈钢中加入的铬、镍等元素会提高其退火温度。 3. 期望的物理性能:根据铁件的使用需求,期望获得的物理性能如韧性、...