研究发现,通过将核糖体进入位点构建至基于核酶构建的环状RNA过表达载体中,可以促使环状RNA高效稳定地翻译蛋白,这也开创了外源性环状RNA在真核生物中表达蛋白的先例,为环状RNA的新应用奠定了理论基础。 03基于二聚体RNA结合蛋白过表达环状RN...
二、circRNA过表达 流程 circRNA慢病毒载体 circRNA腺相关病毒载体 简介 环状RNA(circRNA)是一类特殊的非编码RNA分子,也是RNA领域最新的研究热点。与传统的线性RNA(linear RNA,含5’和3’末端)不同,circRNA是一类不具有5'末端帽子和3'末端poly(A)尾巴,并以共价键形成封闭环状结构,由非经典剪接方式进行反向剪接而形成...
1.过表达（Overexpression）：当我们说一个基因在某个样本或条件下“过表达”，我们通常是指相对于某个...
2、miRNA-AAV/LV过表达，MicroRNA过表达载体的构建可以采用miRNA的前体序列作为目的基因插入载体,也有研究...
利用环状RNA(circRNA)测序和芯片技术筛选到差异表达的circRNA后,往往需要开展gain-of-function(功能获得)研究,就需要过表达circRNA。 circRNA过表达思想主要源于circRNA生物形成机制,已有多篇文章报道circRNA成环机制,目前比较公认的成环机制为circRNA侧翼序列的碱基互补配对,称之为Alu结构(如下图)。 circRNA侧翼结构特征 基...
基因过表达是将目的基因的编码区克隆到相应的工具病毒载体上,导入细胞使基因实现大量转录和翻译,从而实现目的基因的过表达。此外,还可选择报告基因进行目的基因表达的追踪。RNA干扰 (RNA interference, RNAi)技术通过将与内源mRNA同源的小片段(19-23 bp)外源双链 RNA(siRNA)导入细胞中,引发细胞中相应mRNA高效特异性降...
lncRNA过表达载体 pGM-T-H19,定制服务 lncRNA 过表达载体 pGM-T-H19 在长链非编码 RNA H19 相关研究中具有独特的应用价值,为深入探究 H19 的生物学功能和作用机制提供了有效的分子载体。pGM-T-H19 载体在设计上具备多种有利于 H19 过表达的元件。它具有合适的启动子,能够驱动 H19 基因在真核细胞中的...
竞争性内源RNA(competing endogenous RNAs,ceRNA)是一种全新的基因表达调控模式,近年来备受学术界关注。早在2011年,Pier Paolo Pandolfi团队就首次提出了“ceRNA假说”:即细胞内存在的ceRNAs(如mRNA,lncRNA等)能够通过miRNA应答元件(MRE)...
1. 实现lncRNA的过表达通常涉及将全长lncRNA克隆到适当的表达载体中。2. 常用的载体包括含有可修饰启动子（如CMV）的载体和pcDNA3.1等。3. 长链非编码RNA（lncRNA）是指长度超过200个核苷酸的非编码RNA分子。4. 研究显示，lncRNA在多种生命活动中扮演关键角色，如剂量补偿效应、表观遗传调控、细胞...
基因过表达(overexpression,OE)以及敲降(KO、KD)是研究基因功能的常用技术,敲降的手段多种多样,如化学合成 siRNA、载体构建 shRNA、针对基因组 KO 的 cas9、针对 RNA 的 CRISPRi 等。 但OE 的手段很少,大部分科研工作者只了解构建外源过表达、CRISPR-SAM 两种,那么还有没有其他新颖的方式呢?