基因过表达实验操作由于在基因过表达实验中有多种条件选择,如试剂和细胞株等,在本实验操作中仅以pEX-1空载体为阴性对照,Lipofectamin2000为转染试剂,293T细胞为实验细胞株,按照上述条件分步阐述过表达质粒转染实验的操作过程。如果用户使用不同的细胞株和转染试剂,可根据不同的目的基因和实验条件进行相应的调整。 1、...
基因过表达实验操作由于在基因过表达实验中有多种条件选择,如试剂和细胞株等,在本实验操作中仅以pEX-1空载体为阴性对照,Lipofectamin2000为转染试剂,293T细胞为实验细胞株,按照上述条件分步阐述过表达质粒转染实验的操作过程。如果用户使用不同的细胞株和转染试剂,可根据不同的目的基因和实验条件进行相应的调整。 1、...
2. 双酶切需要注意同尾酶的自连。 这里有一个很牛叉的技术,9爷,亲9爷,kiss nine,CRISPR/Cas9质粒的构建。1.线性化载体;2. sgRNA双链结合;3. sgRNA与载体连接;4. 菌P鉴定。 当然,这些可以通通不懂,咱只要买回来用它,做出来结果。一般要有一个control组,一个空载体组(vector),还有高表达质粒组(OE)。如...
1. 对照组的质粒没有插入片段,比过表达组的小。会有那么一点点的转染效率的差别,质粒小的转染效率高一点。 2. 更重要的原因是,过表达质粒插入了目的基因,会竞争细胞内部的营养物质,从而导致荧光蛋白的表达量下降,过表达组荧光就不如对照组。 3. 假如目的基因和荧光蛋白是融合表达,还有一个原因是目的基因影响了...
原目的是上面那条接近55的条带,中间的泳道是转染了过表达质粒的样本,左边是空载,右边是空白对照,过表达组在接近40的位置出现了颜色极其黑的一个条带 询问公司怎么构建的过表达质粒没有回复,我猜测应该没有用其他的修饰方法 公司给出的解释是外源性质粒表达的蛋白和内源性蛋白大小有差别,跑的效果好会有两个条带...
然后去过表达它的点突变，这个是可以做的，一般情况下你只需要在构建过表达时，把shrna靶点序列同义...
Hieff Trans® mRNA转染试剂是一款针对mRNA细胞转染的阳离子多聚物转染试剂，对常规细胞、原代细胞、神经...
首先确定你是要做原核过表达或是真核过表达，两种的过表达载体不一样，而且不同的细胞中过表达用的promoter也不太一样，你要自己好好查查。选定载体后，构建质粒，先放入克隆菌中大量扩增，提取质粒。原核的话，直接转化表达菌表达就行了，真核的话需要进行细胞转染，简单点可以去买转染试剂盒，再按...
用Zeta Life Advanced DNA RNA,AD600150转染试剂转染含有Mincle过表达质粒pcDNA3.1到骨髓源巨噬细胞(BMDM)的部分文章。
要做目的基因过表达的质粒转染,想在公司买质粒,请问哪家公司比较好?另外公司需要哪些信息啊960化工网专业团队、用户为您解答,有要做目的基因过表达的质粒转染,想在公司买质粒,请问哪家公司比较好?另外公司需要哪些信息啊的疑问