我们采用愈创木酚法对过氧化物酶(POD)进行活性测定。其主要操作步骤可参考:1.取克剪碎叶片于预冷研钵中,加入5ml的提取介质L 的磷酸缓冲液(含1%PVP[聚乙烯吡咯烷酮)(先加3ml研磨,再加2ml冲洗研钵),研磨匀浆,转入离心管后于冰箱中冷提12h。1000r/min离心20min,得到酶初提液。2.取200mlPBS[磷酸缓...
过氧化物酶活性还可以每分钟反应体系在波长470 nm处吸光度值读数变化增加1时所需的酶量为1个活性单位(U),表示为U = △OD470·min-1·mg-1蛋白质。酶提取液中蛋白质含量可利用考马斯亮蓝染色法进行测定。即:其中,C表示酶提取液中蛋白质含量(mg/mL)。这里所计算的实际上是酶的比活力,有利于减少操作...
实验五_过氧化物酶酶活性的测定 一、实验原理 1. 过氧化物酶(POD)在植物生长过程中发挥重要作用。在压力、紫外线辐射、微生物侵入和病原体感染等外界刺激下,植物组织中的过氧化物酶活性会显著增加,以保护植物免遭伤害。 2. 过氧化物酶是一种氧化酶,催化产生氧气的反应(如下):...
最佳答案 回答者:网友 过氧化物酶活性=(ΔA470×Vt/W×Vs×0.01×t)×[u/g min]式中:ΔA470为反应时间内吸光值的变化;W为所称样 品重,g;t为反应时间,min;VT为提取酶液总体积, ml;VS为测定时取用酶液体积,ml。我来回答 提交回答 重置等
过氧化物酶是一种广泛存在于植物组织中的酶,能够催化过氧化氢(H2O2)分解为水(H2O)和氧气(O2)。在实验中,通过测定在一定时间内POD分解H2O2产生氧气的量,来评价POD的活性。 反应方程式如下: 2H2O2 → 2H2O + O2 本实验采用愈创木酚法测定POD活性。愈创木酚在POD催化下被氧化,生成对苯醌,进而与氯化铁形成紫色...
了解过氧化物酶的作用,掌握愈创木酚法测定果蔬组织中过氧化物酶活性的方法。 二、基本原理 过氧化物酶(Peroxidase,POD)是果蔬体内普遍存在的一种重要的氧化还原酶,它与果蔬的许多生理过程和生化代谢过程都有密切关系。在果蔬的生长发育、成熟衰老过程、抗病、抗氧化、抗逆境胁迫中,POD活性不断发生变化。在受到外界刺...
可利用过氧化物酶POD 在有过氧化氢存在的情况下,能使愈创木酚发生氧化,生成茶褐色物质,该物质在470nm有最大光吸收。2.电化学法 测定过氧化氢酶的电位法,亦可应用来测定过氧物酶的活性。将二个铂电极浸在过氧化物溶液中,当电极上输入2微安的微电流时,则由此呈现出一个平稳的0.40伏的起始电压。当加入...
艾美捷Worthington过氧化物酶的测定: 方法:传统上,过氧化物酶活性以连苯三酚的氧化速率为单位表示,这是 Willstalter 和 Stoll 在 1917 年引入的一种方法,最近的研究表明这种方法有些不足。(Maehly 和 Chance 1954。)在过氧化物酶测定系统中已经使用了多种氢供体,包括可能致癌的化合物,例如邻联茴香胺。采用 4...
过氧化物酶(peroxidase, POD)是植物体内普遍存在且活性较高的一种酶,该酶催化以H2O2为氧化剂的氧化还原反应,在氧化其他物质的同时,将H2O2还原为H20,用以清除细胞内的H2O2,是植物体内的保护酶之一 。此外POD与植物的呼吸作用、光合作用、生长素的氧化 以及木质素的形成等有关,其活性随植物生长发育进程以及环境...