人体的血液等多种组织中均含有过氧化氢酶(CAT),其活性可作为某些慢性疾病预防诊断的指标。荧光法是测定过氧化氢酶活性的一种常见方法,其检测原理如图1:请回答下列问题:(1
比色法通过检测反应中的副产物或使用显色剂间接测定 CAT 活性。此方法常结合过氧化物酶(POD)或其他显色剂来检测反应中的 H₂O₂ 残留量。常用的显色剂包括过氧化物酶与对苯二胺(DAB)或邻联甲苯胺(TMB),它们会与 H₂O₂ 反应生成带有颜色的产物,通过分光光度计测定吸光度,间接推导出 CAT 活...
原理:CAT活性可以通过分解过氧化氢生成水和氧气的过程来测定。在CAT的作用下,过氧化氢分解的速率与CAT的活性成正比。而过氧化氢在240nm波长处有强烈吸收,因此可以通过监测240nm波长处吸光度的变化来测定CAT活性。在一定的反应条件下,CAT活性可以通过单位时间内吸光度的变化值与标准曲线中对应浓度的吸光度变化值之...
H2O2含量升高 ,并产生类似于凋亡的细胞死亡,植物的抗病因子水杨酸 (SA) 则能够抑制CAT的活性,产生过多的ROS,从而引起系统性防卫反应,或者在植物受到病原微生物侵染的氧化迸发初期阶段,CAT分解H2O2,生成氧分子,触发了苯甲酸生成SA,导致SAR反应发生,如转玉米CAT2基因的烟草引起更为严重的超敏反应,从而有效地控制细菌感...
在CAT催化H2O2分解为水和分子氧的过程中,该酶起电子传递作用,而过氧化氢既是氧化剂又是还原剂。酶 2H2O2→ 2H2O + O2 因此,可根据反应过程中过氧化氢的消耗量来测定该酶的活性。过氧化氢在波长240 nm处除具有吸收峰,利用紫外分光光度计可以检测过氧化氢含量的变化。三、材料、仪器及试剂 (一)材料 苹...
这是检测CAT活性最常用的方法之一,基于过氧化氢在紫外光下的吸光度随其浓度的变化而变化。具体原理是:在240 nm波长下,过氧化氢具有明显的吸收峰。随着过氧化氢被过氧化氢酶分解,其吸光度逐渐降低。通过测量反应体系中吸光度的变化速率,可以计算过氧化氢酶的活性。步骤简述:准备一定浓度的过氧化氢溶液。加入样品...
电化学法是一种快速、灵敏的S-CAT活性检测方法,适用于微量样品的检测。其基本原理是利用S-CAT催化过氧化氢分解生成氧气,氧气可以在电极表面发生氧化还原反应,通过测定电流或电位的变化来计算S-CAT的活性。步骤:制备反应体系:将土壤样品与过氧化氢溶液混合。反应:在电化学池中进行反应,使反应充分进行。测定电流或...
检测原理:H2O2在240nm下有特征吸收峰,CAT能够分解H2O2,使反应溶液240nm下的吸光度随反应时间而下降,根据吸光度的变化率可计算出CAT活性。操作步骤可参考:取克剪碎叶片于预冷研钵中,加入5ml的提取介质L 的磷酸缓冲液(含1%PVP)(先加3ml研磨,再加2ml冲洗研钵),研磨匀浆,转入离心管后于冰箱中冷提12h。
过氧化氢酶CAT活性测定. 过氧化氢酶活性测定---紫外吸收法 过氧化氢酶普遍存在于植物的所有组织中, 其活性与植物的代谢强度及抗寒、 抗病能力有一定关系,故常加以测定。 一、原理】 H2O2在240nm波长下有强烈吸收, 过氧化氢酶能分解过氧化氢, 使反应溶液吸光度(A240)随反应时间而降低。根据测量吸光率的变化速度...
原理 过氧化氢酶(Catalase, CAT, EC 1.11.1.6)是一种常见的抗氧化酶,可催化过氧化氢(H2O2)分解为水和氧,普遍存在于含有细胞色素系统的好氧细胞中。过氧化氢对细胞是高度有害的,其积累将导致细胞靶标(例如DNA,蛋白质和脂质)的氧化,从而导致诱变和细胞死亡。通过使用过氧化氢酶从细胞中去除过氧化氢...