2、HRP还可用于化学发光检测、用于免疫印迹和免疫组织化学实验、与葡萄糖氧化酶联用,用以检测葡萄糖含量等。 3、HRP也常用与污水处理。工业废水中含有大量的苯酚,双酚A等分类和芳香胺类化合物,等环境污染较大,HRP可以将这些污染物作为底物,氧化成自由...
原理:一般使用的发光液A和B分别是鲁米诺和过氧化氢,在辣根过氧化物酶(HRP)的催化作用下,鲁米诺与过氧化氢反应生成一种过氧化物,过氧化物不稳定随即分解,形成一种能发光的电子激发中间体,当后者由激发态返回至基态,就会产生荧光。 在发光过程中不需要消耗HRP,HRP只是起催化作用,所以只要HRP没降解失活,是可以重复...
3.化学发光HRP可催化化学发光底物如ABTS、TMB等生成氧化态化合物,在可见光范围内产生强烈的光信号。这一特性使得HRP在化学发光免疫分析、生物成像和DNA检测等领域具有广泛应用前景。利用HRP的化学发光特性,还可实现对生物分子在细胞内的定位及动态变化的研究。三、研究方向1.HRP的催化机制及调控机理HRP的催化机制及调...
显色(HRP酶) 1.增强化学发光法(ECL) Ecl 显色原理:氨基苯二酰肼类主要是鲁米诺及异鲁米诺衍生物,是最常用的一类化学发光剂。鲁米诺(luminol,5'-氨基-2,3-二氢-1,4-酞嗪二酮)的分子结构及化学反应式如下: 鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物,也可用作过氧化物酶的底物。在Ecl底物中,含有H2O2和鲁米诺,...
辣根过氧化酶使试剂中的发光物(luminol)氧化并发光,辣根过氧化物酶是一种含亚铁血红素的蛋白质,HRP分布于植物界,它是由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成的糖蛋白,糖含量18%。HRP由多个同功酶组成,Mr在40000左右,等电点7.2。溶于水,溶解度为5%(W/V),溶液呈棕红色,透明。 ECL在化学领域,是一种化学发光...
偶合反应化学发光分析法,该法将HRP催化HgO氧化KI生成I的反应与工uminol-Ig的化学发光反应偶合起来,根据发光强度确定HRP及其标记物的量.此法测定HRP(RZ=2.5-3)的线性范围是10—6000 pg(或0.25-150 fmol),检测下限为7pg(或0.18 fmol),对20 pg HRP进行11次乎行测定,相对标准偏差为7.5%、与HRP催化Luminol-HpO...
HRP 和聚 HRP 偶联物使用底物进行可视化,当使用过氧化氢被 HRP 氧化时,会产生可量化的信号。它们是各种 HRP 底物,这些底物分为三大类:显色底物、荧光底物或化学发光底物。 比色底物产生可见的颜色变化,可以使用吸光度酶标仪进行测量。虽然它们对于 HRP 检测来说最容易使用且最经济实惠,但显色底物的灵敏度不如荧光...
常用的标记物包括荧光素、酶和放射性核素等,用这3种标记物进行标记的免疫检测技术被称为3大免疫标记技术。目前,使用的免疫标记物还有化学发光物质、铁蛋白和胶体金等。 辣根过氧化物酶(HRP)标记的原理: 辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP )
TMB显色原理:TMB是一种底物,可以被辣根过氧化物酶(HRP)催化氧化而产生显色产物。在酶标记实验中,通常将TMB与过氧化氢(H2O2)混合,然后加入HRP标记的抗体或其他分子。HRP与TMB-H2O2反应产生的显色产物为蓝色,通常可通过对应波长下的吸光度测量或肉眼观察进行定量或定性分析。HRP显色原理:HRP是一...