M13KO7 辅助噬菌体适合与 M13/噬菌粒宿主一起使用,以便从含有 f1 或 f1 复制来源的载体中生产 ssDNA。此高滴度的辅助噬菌体通过改变 Vieira 和 Messing 程序制备 (1),无需单独储备和维持独立的辅助噬菌体。它包含 Kmr基因和 p15A 复制来源,使其可像细胞内部质粒一样复制。ss DNA 生产的详细实
为了解决这些问题,研究团队结合噬菌体辅助进化和蛋白工程技术,开发出新一代先导编辑器。 一、噬菌体辅助进化(PE-PACE) 研究团队构建了一个基于T7 RNAP的定向进化系统,将RT活性与噬菌体增殖直接关联(图1)。通过连续进化压力筛选,获得了多个高效RT变体:超小型RT:Ec48 RT(1.2 kb)经22倍效率提升,性能媲美全长M-ML...
为了解决这些问题,研究团队结合噬菌体辅助进化和蛋白工程技术,开发出新一代先导编辑器。 一、噬菌体辅助进化(PE-PACE) 研究团队构建了一个基于T7 RNAP的定向进化系统,将RT活性与噬菌体增殖直接关联(图1)。通过连续进化压力筛选,获得了多个高效RT变体:超小型RT:Ec48 RT(1.2 kb)经22倍效率提升,性能媲美全长M-ML...
试题来源: 解析 答案: 辅助噬菌体(helper phage)是指产生另一些噬菌体所不能产生的重要蛋白质,使另一些噬菌体得以生长和繁殖的噬菌体。辅助噬菌体通过对细菌的感染向某种缺陷性噬菌体提供后者所缺少的功能,使后者能够完成其感染生活周期。 解析:空反馈 收藏 ...
辅助噬菌体是一种自身DNA复制效率极低的丝状噬菌体突变型。其基因组具有M13噬菌体的所有功能基因,但IG区是缺陷的,不能被pⅡ蛋白识别,因而辅助噬菌体本身DNA不能进行单链复制。辅助噬菌体能为噬菌粒提供pⅡ蛋白和包装蛋白,在辅助噬菌体的帮助下,噬菌粒可以顺利的进行DNA的复制与噬菌体的包装,完成对宿主的侵染(这一...
ExAssist 辅助噬菌体包括XOLR 的 ExAssist 辅助噬菌体可在 Lambda 载体系统中大量切除文库。 1、ExAssist 含有琥珀突变,可防止噬菌体基因组在非抑制大肠杆菌菌株(例如 XLOLR 细胞)中复制; 2、XLOLR 细胞对 Lambda 感染具有抗性,可防止切除后的 Lambda DNA 污染。 体积 1 mL 载体大小 7.3 Kb 部件号 说明 ...
噬菌体辅助连续进化技术(PACE)将生物分子的实验室进化与噬菌体M13的生命周期结合在一起(该噬菌体的生命周期仅为10分钟),使实验室中生物分子的进化速度提高了100 倍
用于筛选的M13噬菌体包含3个质粒,SP(selection phage)包含使用待进化基因替换噬菌体外壳蛋白pIII基因gIII的噬菌体全套基因,AP(accessory plasmid)用于当分子胶存在活性时提供pIII,MP(mutagenesis plasmid)包含提高SP突变概率的一系列蛋白。选择压力为连续(...
四、应用场景 这项研究通过噬菌体辅助进化和蛋白质工程,成功开发了更紧凑、高效的Prime Editors(PE6),为基因编辑技术的发展提供了新的突破。PE6系列Prime Editors在编辑效率、编辑器尺寸和体内应用方面均表现出显著优势,为未来基因治疗提供了新的可能性。
图2. 噬菌体辅助下ZF的持续进化系统示意图。 与人类CRBN相比,小鼠CRBN(mmCRBN)包含可阻止IMiD诱导的ZF新底物招募的V388I突变,开发出与mmCRBN兼容且有效的降解子将有助于小鼠靶蛋白功能的研究。为此,他们构建了mmCRBN MG-PACE系统,利用S...