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重组表达载体构建流程图 x 重要通知 专栏投稿绿色通道: 1、植物基食品原料基础研究、前沿技术创新及其健康绿色产品开发 2、地方特色食品:加工技术、感官品质、风味特性和营养健康
实验流程 概述: 以下为使用pRI载体的方法概述。 1. 将合成的正义和反义寡核苷酸链退火。 2. 用BglII和XhoI双酶切载体。 3. 将退火的寡核苷酸链与酶切后的线性载体连接。 4. 连接产物转化大肠杆菌。 5. 转染细胞。 6. 观测荧光表达(含有GFP的载体)或筛选稳定表达细胞(含有抗性的载体)。 7. 检测目标基因蛋...
研究人员开展人乳铁蛋白基因乳腺特异性表达载体构建及转染研究,主要流程如下图。RT-PCR过程需先进行逆转录合成DNA,然后再进行PCR。图中AseI、NheI、SalI、BamHI代表相关限制酶切点,neoF为新霉素抗性基因,BLG基因为B乳球蛋白基因,GFP基因为绿色荧光蛋白基因。请回答:人乳腺细胞总RNA①hLF基因BLG基因GFP基因RT-PCRSalI...
下图是利用β-乳球蛋白(BLG)基因5端调控序列和人乳铁蛋白(hLF)基因构建能在羊乳腺细胞特异性表达的运载体的简要流程图(图中的BamHI和 HindI是限制酶),请据图回答下列问题:λEF⊥ABBamH IHindIhLF基因抗性基因重组BLG基因③抗性质粒5'端调控序列基因质粒(1)图中 ②为PCR过程。利用PCR技术扩增目的基因后需要构建...
(2)BamH I和Hind III切割形成的粘性末端不同,选用这两种酶切割目的基因和质粒,目的是避免目的基因和运载体产生的末端任意连接(环化连接).构建基因表达载体还需要DNA连接酶酶.(3)BLG基因5′端调控序列作为启动子,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动hLF基因转录出mRNA,所以能使hLF基因在羊的乳腺细胞中特异性表达。
1下图是利用β—乳球蛋白(BLG)基因5′端调控序列和人乳铁蛋白(hLF)基因构建能在羊乳腺细胞特异性表达的运载体的简要流程图(图中的BamHⅠ和HindⅢ是限制酶)。请据图回答下列问题:(1)图中②为PCR过程。过程①和②中用到的工具酶共同的特点是 。过程②除了要加酶、模板、原料外,还需要加入特定的 。(2)图中...
(2)BamH I的识别序列为﹣G↓GATTC﹣,Hind III的识别序列为﹣A↓AGCTT﹣,选用这两种酶进行操作时产生的黏性末端不同,这样可以避免目的基因和运载体产生的末端任意连接(环化连接);③为基因表达在的构建过程,该过程首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA和运载体,其次还需要DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成...
分析:分析题图:图示表示构建转人抗体基因小鼠生产人源性单克隆抗体的流程,其中①表示基因表达载体的构建过程;②表示动物细胞融合过程(骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合). 解答: 解:(1)图示过程涉及的生物技术有转基因技术、动物细胞培养技术、动物细胞融合技术、体外受精技术等.(2)①表示基因表达载体的构建过程,该过程首先...
分析分析图解:图甲为基因表达载体的模式图,基因表达载体包括复制原点、启动子、终止子、标记基因(插入基因)、标记基因(抗生素抗性基因)等. 若图乙表示基因工程的操作流程图,则表示基因表达载体的构建和转化过程,C可表示重组质粒,D是受体细胞. 图丙表示单克隆抗体制备的过程,图中需要对骨髓瘤细胞去核,然后进行细胞核...