研究选择了以下三种DNA浓度和PEI:DNA比例组合，评估不同条件下的效果：转染100 ml细胞，在转染后24小时和转染后3天，在CD CHO中加入66 ml胰蛋白胨N1，将一半培养物转移到30 ℃中。转染后7天，在37℃下收获细胞，而在30℃下收获的细胞，当活率降至90%以下时，即11至14天。▶条件A：0.5 µg/mL DNA，...
新型X-tremeGENE™360转染试剂是一种通用聚合物，非常适合转染常见和难转染细胞系。更多内容请到默克生命科学官网查看：www.sigmaaldrich.cn 转染 CHO-K1 细胞 以1.5 X 104个细胞/孔的密度铺板CHO-K1 细胞。转染前 18-24 小时（65-75% 汇合度），在100μl 完全生长培养基/孔的 96 孔板中铺板细胞。细胞培...
8.CAKI-1 细胞系转染试剂：主要用于肾癌细胞的转染试剂。Caki-1 细胞系可用于研究人类近端小管上皮。9.CALU-6 细胞系转染试剂：主要用于人肾素表达细胞的转染试剂。10.CFPEO细胞系转染试剂：CFPEO细胞系研究主要方向是哮喘、病毒感染、纤维化肺病和囊性纤维化等呼吸道问题。而CFPEO细胞系转染试剂一般适用于用于人气...
建立好的 HBV DNA 转染细胞系具有较好的可重复性和稳定性。在相同的培养条件下，细胞系能够持续表达 HBV 相关蛋白和病毒颗粒，为实验研究提供了可靠的模型系统。这使得不同实验室之间可以进行比较和验证实验结果，有利于推动 HBV 研究的深入发展。（二）可控性 通过对转染条件、细胞系选择以及培养环境等因素的控制，...
转染是一种基因转移方法，其中遗传物质通过化学或非化学方法故意引入宿主细胞。有两种类型的稳定转染细胞系：稳定细胞系的主要类型是通过将转染的DNA直接整合到宿主生物体的基因组中而产生的。转染的DNA通过同源重组整合到基因组中。产生稳定细胞系的另一种方法是转染DNA的游离体维持。真核载体用于转染未整合到基因组中...
· THP-1细胞系：购自某生物公司，用于构建稳定转染细胞系。· 293T细胞：用于包装慢病毒颗粒。· pLenti-EF1a-EGFPP2A-Puro慢病毒载体：用于构建FNDC5过表达载体。· 某试剂：用于细胞培养、转染和筛选。· 威尼德电穿孔仪：用于细胞电穿孔转染。· Western blot试剂盒、RT-PCR试剂盒：用于检测基因和蛋白表达。·...
研究转染材料的细胞系 研究转染材料的细胞系 研究转染材料的细胞系时，选细胞系要看研究方向。基因治疗偏向HEK293或CHO这类高转染效率的细胞，病毒载体研究多用HeLa或A549这类易感宿主细胞。原代细胞适合模拟真实生理环境，但培养难度大，转染成功率低。细胞状态直接影响实验结果。传代次数超过30代的HEK293可能出现基因...
采用RT-PCR和FACS检测稳定转染细胞系中CD34基因和蛋白的表达水平。同时，设立未转染的3T3细胞作为阴性对照。结果 1. CD34基因扩增与测序 成功从KG1a细胞中提取总RNA，并扩增出CD34基因片段。测序结果表明，扩增片段与GenBank中CD34基因的序列完全一致。2. 真核表达载体构建与鉴定 成功构建了重组载体pCI-neo/CD34和...
经过多轮筛选和克隆扩增，建立稳定的HBV全基因组克隆转染细胞系。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）、免疫荧光染色、Western blotting和电子显微镜等多种方法对构建的细胞系进行鉴定。实验结果 克隆构建与序列分析经过PCR扩增和克隆构建，成功获得了HBV全基因组克隆重组质粒。序列分析结果表明，克隆的HBV全基因组序列与GenBank...
最近在做慢病毒包装、转染相关实验,构建稳转细胞系,大家快跟我一起学习起来吧~ 【一】基础知识 稳定转染:将外源基因整合到宿主细胞基因组中,使外源基因能够在宿主细胞中长期表达。 实验方法:慢病毒表达系统介…