转录因子结合至启动子区域，并改变其启动子功能的强弱，便可引起下游报告基因Fluc转录水平发生变化，进而影响其蛋白翻译，最终底物与荧光素酶反应发生变化，荧光强弱发生改变，最终达成互作功能验证。1）验证转录因子与启动子是否有互作（转录因子过表达载体TF、过表达空载TF-空载）表3. 启动子和转录因子结合验证双荧光素...
有以下证据表明启动子与转录因子结合: 1. EMSA(电泳迁移实验):该实验利用电泳迁移原理,通过观察DNA与转录因子的结合是否改变DNA的迁移性质来判断转录因子与启动子的结合。在该实验中,DNA与转录因子结合后会形成一个复合物,这个复合物的迁移性质与自由DNA不同,可以通过电泳迁移速度的变化来判断启动子与转录因子的结合...
JASPAR是目前比较常用的转录因子与启动子结合预测数据库，我们以转录因子STAT3为例，预测人源STAT3与CD274基因启动子的结合位点。操作如下：在JASPAR首页查询STAT3，然后勾选相应的物种（homo sapiens）。点击右侧的“Scan”，即会展开一个框框，把前面查询到的启动子序列的fasta格式复制进去，再点击右下角的“Scan”即可...
荧光素酶报告基因实验是检测这类转录因子和其靶启动子中的特异顺序结合的重要手段,其原理简述如下:1、构建一个将靶启动子的特定片段插入到萤光素酶表达序列前方的报告基因质粒,如pGL3-basic等。2、将要检测的转录因子表达质粒与报告基因质粒共转染293细胞或其它相关的细胞系。如果此转录因子能够激活靶启动子,则萤光素...
双荧光素酶验证转录因子与启动子结合位点 CAS号: 英文名: Dual luciferase assay to verify the binding sites of transcription factors and promoters 英文别名: Dual luciferase assay to verify the binding sites of transcription factors and promoters
预测结果:与未处理细胞相比,处理后细胞内的p-PERK、p-eIF2α、有关转录因子、Bax含量增多,BCL-2含量减少 【解析】 本题需要从题图中获取有效信息,结合题干及所学知识进行解答。分析题图:内质网应激蛋白( BiP )与折叠错误的蛋白结合,使 PERK 发生磷酸化被激活, p-PERK (磷酸化 PERK )促进 eIF2α 的磷酸...
预测结果:与未处理细胞相比,处理后细胞内的p-PERK、p-eIF2α、有关转录因子、Bax含量增多,BCL-2含量减少 【解析】 本题需要从题图中获取有效信息,结合题干及所学知识进行解答。分析题图:内质网应激蛋白( BiP )与折叠错误的蛋白结合,使 PERK 发生磷酸化被激活, p-PERK (磷酸化 PERK )促进 eIF2α 的...
预测结果:与未处理细胞相比,处理后细胞内的p-PERK、p-eIF2α、有关转录因子、Bax含量增多,BCL-2含量减少 【解析】 本题需要从题图中获取有效信息,结合题干及所学知识进行解答。分析题图:内质网应激蛋白( BiP )与折叠错误的蛋白结合,使 PERK 发生磷酸化被激活, p-PERK (磷酸化 PERK )促进 eIF2α 的磷酸...
预测结果:与未处理细胞相比,处理后细胞内的p-PERK、p-eIF2α、有关转录因子、Bax含量增多,BCL-2含量减少 【解析】 本题需要从题图中获取有效信息,结合题干及所学知识进行解答。分析题图:内质网应激蛋白( BiP )与折叠错误的蛋白结合,使 PERK 发生磷酸化被激活, p-PERK (磷酸化 PERK )促进 eIF2α 的磷酸...