一、制备琼脂糖凝胶 制备琼脂糖凝胶是跑琼脂糖凝胶电泳的第一步。首先,将琼脂糖溶解在适当的缓冲液中,加热至沸腾,直到琼脂糖完全溶解。然后,将溶液倒入电泳槽中,待其冷却凝固后形成凝胶。在制备琼脂糖凝胶时,需要注意凝胶浓度、缓冲液的pH值和离子强度等实验条件的选择,以达到最佳的分离效果。 二、样品处理 样品处...
将凝固的胶板装入电泳槽内,并在电泳槽内加入SDS-PAGE电泳缓冲液,把胶浸泡一段时间,时间越长越好(防止梳子与胶相连,或胶因湿度不够而萎缩);(6)点样时,再把梳子拔出来,拔时动作要轻,防止胶齿被拔断。二、SDS-PAGE电泳1、调胶:拔掉SDS胶上的梳子,并用小针调整齿的位置(使它们都平行)。2、点...
跟跑DNA胶一样,电泳液用新鲜的,然后用1.3%的胶 跑DNA胶我也没做过,我现在是研一,上面师兄师姐...
说一下我的步骤。1,分离胶12%,浓缩胶4%。胶的制备可以确定没问题。2,样品处理:提蛋白时用的是碱溶酸沉法,稻米已脱脂。称取自己提的稻米蛋白1mg以后用1mlPBS稀释。测样品蛋白浓度,显示所提蛋白杂质含量较高,大概在1.5mg/lml左右。短离心,煮沸10分钟,再10000转离心10min。上样量分别加了10ul,5ul。3,电泳...
跑蛋白胶电泳分析需要的材料有:电泳槽、凝胶板、电极、试剂、样品等。在进行跑蛋白胶电泳前,需确认所有材料都已准备好,并检查是否完好无损。 二、安装电泳槽 1. 在安装电泳槽前,需先检查电泳槽是否清洁干净,无杂质。将电泳槽插头连接好,注意电极连接的极性。 2. 将电泳槽放置在水平位置上...
看你的目的了,要是想知道pcr产物的序列,就是 切胶,回收,连接,转化,挑单克隆摇菌,提质粒,送测序
3. 电泳:电泳时间一般4~5 h,电压为40 V较好,也可用60 V。电泳至溴酚兰刚跑出即可终止电泳,进行转膜。 (五)转膜 1. 转一张膜需准备6张7.0~8.3 cm的滤纸和1张7.3~8.6 cm的硝酸纤维素膜。切滤纸和膜时一定要戴手套,因为手上的蛋白会污染膜。将切好的硝酸纤维素膜置于水上浸2 h才...
其实做的多了,根本就不会去计算,只要大致看一下在marker的那两条带之间即可,反正那种计算本身也不准,也是近似结果。所以无需要特别计算,如果你的条带是5点几kb,刚好在1kbmaker的5、7kb之间偏下,基本上即可确定扩增出来了,如果不在两者之间,计算也没用,你扩的可能是非特异带 ...
琼脂糖甲醛变性电泳胶RNA样品处理方法: 取一定浓度的总RNA样品,用DEPC水将体积调至11 μL,加入5 μL 10×MOPS,9 μL浓度为12.3 mol/L甲醛溶液以及25 μL去离子甲酰胺溶液,漩涡振荡器震荡数秒混匀溶液,短暂离心5~10 s,55 ℃保温15 min后加入10 μL甲醛加样缓冲液,漩涡振荡器震荡混匀溶液,短暂离心5~10...
三条或者四条都是正常的 不一样的质粒形态么