超分辨率技术凭借着不同的原理成功“突破”了光学成像的衍射极限。其中,基于单分子定位重建原理的 STORM/PALM 技术,在目前的超分辨率技术中,堪称空间分辨率最高的方法。由于单分子定位的精度在很大程度上取决于探测器采集到的荧光分子的光子数量,为了进一步提升其空间分辨率,近些年来,众多研究组可谓是绞尽脑汁,采用了诸如...
1.超分辨率荧光显微技术的原理 抑制光的衍射:传统光学显微镜无法突破维恩衍射极限,限制了其分辨率。超分辨率荧光显微技术利用光的非线性响应和光学调制技术,使得衍射限制得以突破。例如,利用单分子荧光显微技术,可以将荧光标记的分子在时间上进行“开关”,只有少数分子发出荧光,可以精确定位每个分子的位置。利用这种方法,可以...
而且是由应用的不同成像方法引起的,而超分辨率显微成像技术,如结构化照明显微镜(SIM)和光活化定位显微镜(PALM),以超出光的衍射极限的高精度定位单个分子,可以更可靠地计数细胞中的分子。
超分辨率荧光显微成像技术PPT课件 超辨别率荧光显微成像技术 点扩散函数工程超辨别率显微成像技术(STED/RESOLFT)光激活定位显微技术(PLMA)近场光学成像技术(NSOM)•一种经典的STED显微系统中有两束照明光，其中一束为激发光，此外一束为损耗光。当激发光的照射使得其衍射斑范围内的荧光分子被激发，其中的电子跃迁到...
图1. 使用 STORM 对人脑样本进行超分辨率成像 STORM 在人脑切片中对神经丝 (NF) 免疫染色的皮层轴突的采集：首先获得传统的宽视场荧光显微镜图像 (B1)，然后强烈增加激发功率以诱导荧光团闪烁，并产生数千帧图片（B2-B5）。在每帧基础上以亚像素精度 (B6-B9) 检测激活的荧光分子的定位。然后使用来自所有帧的累...
【摘要】2014年诺贝尔化学奖授予Eric Betzig,Stefan W. Hell和William E. Moerner3位科学家,以表彰他们在超分辨率荧光显微成像技术方面的重大贡献。本文从显微镜分辨率的起因入手,对超分辨荧光显微技术进行了深入阐述。此外,对光学显微技术的发展前景进行展望。201
STORM实现超分辨是基于对每个荧光团的定位，因此这种技术也被称为单分子定位显微（single molecule localization microscopy， SMLM）。然而，受荧光探针和成像过程特点的限制，STORM在活细胞成像中的应用仍然面临巨大的挑战。STORM实现超分辨的第一个关键要素是光开关荧光探针。以商用染料Alexa Fluor 647为例，传统STORM实验...
那这个技术是怎么做到这么厉害的?这就像是给细胞里面的小零件都贴上了一个个小小的“荧光标签”。这些“荧光标签”会发出不同颜色的光,就像给它们穿上了五颜六色的衣服。当新型超分辨率荧光显微成像技术这个“超级放大镜”照到它们的时候,就能根据不同的颜色,把它们一个个都分辨出来!是不是很神奇? 这个技术不仅...
超分辨率荧光显微技术——2014年诺贝尔化学奖