1.使用质谱数据处理软件(如MaxQuant、Mascot、PEAKS等)对数据进行分析。 2.软件会将得到的肽段信息与已知的蛋白质数据库进行比对,以鉴定蛋白质的身份。 3.可以进一步提取蛋白质的量化信息、翻译后修饰等。 七、验证和解释: 1.对于重要或意外的发现,可能需要进一步的实验验证。 2.用其他方法或实验进一步解释和理解...
通过实验准备所需的样本细胞，再经过分离提纯得到蛋白质样本，包括单一蛋白质（纯化蛋白、2-DE/DIGE凝胶胶点、SDS-PAGE单一条带）、全谱蛋白质（完整组织、体液或者提取物）、混合蛋白质（蛋白混合液、WB条带、Co-IP和Pull-down产物）。使用蛋白酶消化蛋白质使之成为含有6-20个氨基酸的肽段。将酶解得到的肽段进行...
当一个未知蛋白被酶解,用质谱可以检测出其中所含有几乎所有肽段的质量。然后把这些质量与数据库中已知的所有蛋白指纹进行匹配。匹配分值高过一定的 就可以认为索要坚定的蛋白就是那个目的蛋白。步骤:2DE 切点 消化 送入质谱仪分析 质谱仪自动获得质量数 送入数据库进行搜索 得出结果。关键:要知道质谱仪是用于检测小...
当一个未知蛋白被酶解,用政号段质谱可以检测出其中所含有几乎所有肽段的质量。然后把这些质量与数据库中已知的所有蛋乐展主建士绝六白指纹进行匹配。 匹配分值高过一定的 就可以认为索要坚定的蛋白就是那个目的蛋白。 步骤: 2些垂倒名乐湖名斗块DE 切点 消化 送入质谱仪分析 质谱仪自动获得质量数 送入数据库...
使用质谱流式细胞技术的首个步骤是样品制备。这通常涉及对单个细胞的收集，随后进行必要的处理以用于后续的标记过程，如固定、渗透和阻断等。3.抗体标记 在样品制备后，接下来是使用稀土金属标记的抗体进行标记。每种抗体都针对特定的生物标志物，如蛋白质或磷酸化位点，并且每种抗体都通过特定的稀土金属进行标记，使得...
本视频概述了使用质谱(MS)分析蛋白质翻译后修饰的完整工作流程。该工作流程包括从细胞培养物或组织中蛋白质的纯化,蛋白质样品的预处理,使用液相色谱的MS分析以及数据分析说明。全部分析过程大概在2-3天内完成。 切换到竖屏全屏退出全屏药时空已关注分享点赞在看...
可使用磷酸酶对磷酸化位点进行去磷酸化处理,然后使用质谱分析来验证磷酸化位点。 3.3定点突变法: 可通过定点突变将磷酸化位点改变为非磷酸化位点,然后使用质谱分析来确认磷酸化位点。 质谱技术在磷酸化位点研究中起着重要作用。通过合理的实验设计和质谱分析流程,我们可以精确定位蛋白质中的磷酸化位点。这有助于我们深入...
有些细节不是很理解的上来问下,蛋白质组学通过2DE分离蛋白后,把感兴趣的点酶解了然后拿去质谱分析,然后怎么样才能通过质谱图知道我所感兴趣的蛋白质是哪个蛋白呢,希望能够得到具体... 有些细节不是很理解的上来问下,蛋白质组学通过2DE分离蛋白后,把感兴趣的点酶解了然后拿去质谱分析,然后怎么样才能通过质谱图知道...
18.从所述原始质谱图中选取峰值最大的预设个峰进行打质谱ms2图,并从所述质谱ms2图中提取离子保留时间和氨基酸序列进行裂解后断裂的碎片的质量作为质谱ms2数据。 19.可选的,在所述的基于质谱分析的蛋白质从头肽测序方法中,所述获得一级数据矩阵的方法包括: ...