(1)从早期胚胎神经细胞中提取HuC基因的mRNA,通过逆转录过程合成目的基因,并通过PCR技术在体外扩增可获得大量的目的基因,进而构建出HuC基因的cDNA文库。 (2)构建基因表达载体时,不能破坏运载体上的启动子、复制原点,以及运载体上需要保留标记基因,为了防止目的基因和质粒自身环化以及目的基因与质粒反向连接,常用不同的限...
利用PCR技术可在体外获得大量抗盐基因,该技术需要有一段已知抗盐基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成___;扩增过程需要加入___酶。 (2)构建基因表达载体时,为了防止含目的基因的外源DNA片段和质粒自身环化,最好选用图中限制酶___对它们进行切割。构建重组质粒时,还要在抗盐基因前面加上___,它是RNA聚合酶识别...
液体培养基培养 倒置平皿培养 出现单菌落。 重组质粒的鉴定挑取单菌落在含有 中培养提取重组质粒进行琼脂糖凝胶电泳。以环化的原始质粒 作为对照 电泳结果显示在原始质粒后面的条带 可初步定为阳性克隆。由于重组质粒含有插入基因 可作为模板扩增得到相应的 片断 利用正反向
(1)研究者从其他植物中克隆出花色基因C时采用了PCR技术扩增,其中需要有一段___的核苷酸序列,以便根据这一序列合成___种引物除花色基因C引物之外,扩增过程中还需要___,___。 (2)为防止目的基因的自身环化和任意连接,有同学认为可以用 EcoRI和BamHI两种酶切割含C基因的DNA和图中质粒,有同学认为不妥,理由是...
(1)①过程获得的抗盐基因可用PCR技术进行扩增,该技术须用酶,所需的原料是.(2)已知几种限制酶识别序列及其切割位点(如下表):用图中的质粒和目的基因构建重组DNA分子,不能使用SmaⅠ酶切割,原因是.图中②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,应选用...
[题目]垂体腺苷酸环化酶激活肽是从下丘脑中分离出的一种神经多肽.新型基因重组的PACAP衍生多肽MPL-2具有治疗Ⅱ型糖尿病的功能.下图为含MPL-2基因的重组质粒构建示意图.请分析回答下列问题:(1)MPL-2基因的扩增采用了重叠延伸PCR技术.该技术采用的引物与DNA母链能 .需要
(1)目的基因可用PCR技术扩增,该技术利用 原理,PCR反应体系中应加入 酶.(2)已知几种限制酶识别序列及其切割位点如下表所示: 限制酶 BamHI HindI EcoRI SmnI 识别序列及其切割位点 图中①、②过程为减少质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,并使插入片段尽可能小,应选用限制酶 对外源DNA、质粒进行切割.图中...