（5）诱导成功的标志：单核细胞THP-1用PMA诱导后，由悬浮式生长变成贴壁生长，由圆形变成不规则形态，体积进一步增大，细胞浆疏松，细胞核增大明显，可见大量明显细胞器，胞膜周围可见少量突起。PMA诱导THP-1细胞培养的相差显微照片 用PMA孵育THP-1细胞48h，显示THP-1(40X)在(A)诱导前(B)诱导后的形态学变化。它...
单核细胞THP-1用PMA诱导后,由悬浮式生长变成贴壁生长,由圆形变成不规则形态,体积进一步增大,细胞浆疏松,细胞核增大明显,可见大量明显细胞器,胞膜周围可见少量突起[3]。 图2. THP-1经PMA诱导分化为巨噬细胞 THP-1分化为泡沫细胞 THP-1细胞诱导分化为巨噬细胞后,可以通过摄取大量脂质转变为泡沫细胞,这也是动脉粥样...
THP-1细胞最常用的分化诱导剂是PMA,添加PMA可导致THP-1细胞贴壁并呈现星状。这些细胞表达一些Mφ分化标志物(CD14和CD36),并且相较于未处理的细胞,具有更强的吞噬能力和释放TNF的能力。然而,目前关于THP-1分化中使用的PMA浓度的报道从5 ng/ml到200 ng/ml不等,关于THP-1细胞诱导时间的报道也有所不同,如24h和...
一、THP-1细胞的极化 1) THP-1细胞铺板,将佛波酯PMA(100 ng/ml)加入完全培养基中,诱导其向巨噬细胞的成熟; 2) 48小时后THP-1细胞成熟为巨噬细胞,外观圆形高折光,从悬浮状态快速变成贴壁状态; 3) 将成熟的巨噬细胞消化下来(Accutase酶消化:专门用于消化贴壁细胞),重新铺板,诱导向M1-like、M2-like的极化。
在具体的诱导分化实验中,THP-1细胞首先被佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞。这个过程中,细胞会发生形态变化和生长方式的改变,由悬浮式生长变成贴壁生长,由圆形变成不规则形态,体积进一步增大,细胞浆疏松,细胞核增大明显,可见大量明显细胞器,胞膜周围可见少量突起。 分化后的巨噬细胞可以被进一步诱导分化为M1型或M2型巨...
在诱导过程中，需要密切观察细胞的变化。在加入 PMA 后不久，你会发现 THP-1 细胞开始发生形态变化。原本悬浮生长的 THP-1 细胞逐渐贴壁，细胞形态由圆形变为不规则形状，这是向巨噬细胞分化的重要标志。诱导时间一般为 24 - 48 小时，具体时间可根据实验需求和细胞状态进行调整。诱导完成后，对分化后的巨噬细胞...
在诱导过程中,需要密切观察细胞的变化。在加入 PMA 后不久,你会发现 THP-1 细胞开始发生形态变化。原本悬浮生长的 THP-1 细胞逐渐贴壁,细胞形态由圆形变为不规则形状,这是向巨噬细胞分化的重要标志。诱导时间一般为 24 - 48 小时,具体时间可根据实验需求和细胞状态进行调整。
方法:首先用PMA刺激THP-1细胞分化为巨噬细胞,再分别使用LPS、IFN-γ和IL-6将细胞诱导为M1型巨噬细胞,用IL-4、IL-13和IL-6将细胞诱导为M2型巨噬细胞。显微镜下观察三种细胞的形态学改变,并用流式细胞术检测各细胞主要CD分子表达的差异。 结果:当THP-1分化为巨噬细胞后变为贴壁生长,细胞形态呈较规则的圆形或...
改加入RANKL(50μg/ml)和M-CSF(50μg/ml)刺激,每3d换液。,对细胞进行破骨细胞特有标记物——TRAP细胞化学染色。光镜下观察,TRAP阳性的多核细胞被称作破骨细胞样细胞。2结果THP-1细胞在PMA刺激4d后从悬浮单核细胞分化为贴壁细胞,细胞体积增大,向周围铺展(图1)。刺激到第10天时出现TRAP阳性...
摘要:目的探讨建立有效诱导THP-1细胞分化为破骨细胞样细胞的方法。方法 THP-1细胞首先在TPA的刺激下分化为贴壁细胞,然后在破骨细胞生成因子(RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)的联合诱导下向破骨细胞样细胞分化...