目的 比较不同信号肽对SARS-CoV-2 S1,受体结合域(receptor binding domain,RBD),RBD二聚体蛋白在Expisf9昆虫细胞中分泌表达的影响.方法 选取SARS-CoV-2 S1(M1-E661),RBD(R319-P545),RBD二聚体(R319-K537串联)3种蛋白的基因序列,按照N-端信号肽序列不同[内源(Endo),蜂素honeybee melittin(HBM),GP64,...
c小鼠,对重组蛋白进行免疫原性检测.结果表明,稳定表达PDCoV S和RBD蛋白的293T细胞系构建成功,获得了重组慢病毒,纯化PDCoV S和RBD重组蛋白均可以诱导小鼠产生较高的IgG抗体(S:1.2;RBD:0.9),中和抗体水平分别达1:128和1:64.本研究构建的293T细胞系能稳定表达PDCoV S和RBD蛋白,为进一步研制PDCoV亚单位疫苗奠定了...
66.从液氮罐中取工作细胞株(细胞株为表达重组新型冠状病毒ncp ‑ rbd蛋白的重组cho细胞株,购买于北京智仁美博生物科技有限公司,购买的细胞株可以直接用于下面的操作,作为优选地方案,将购买的细胞株进行三级细胞库的建立后在进行下面的操作),按初始密度不低于3.0 × 105个/ml接种至ex ‑ cellcdchofusion培养基中...
在重组新型冠状病毒疫苗(CHO细胞)制备过程中,直接用于构建基因表达载体的RBD蛋白基因是双链的DNA片段,它可以由新冠病毒的遗传物质在的催化下得到cDNA,再经 PCR技术获取RBD蛋白基因。在PCR过程中必须提供引物,其原因是(2)在基因表达载体中,_提供了目的基因的转录终止信号,其本质是(3)CHO细胞是中国仓鼠卵巢细胞,其...
摘要 为构建稳定表达猪δ冠状病毒(PDCoV)S和RBD蛋白的293T细胞系,获得PDCoV S和RBD蛋白。本研究将优化合成的PDCoV S蛋白全长基因及其RBD的表达质粒进行双酶切鉴定,将重组质粒pLV-S-Puro、pL...展开更多 This study aims to construct a 293T cell line stably expressing porcine deltacoronavirus(PDCoV)S and ...
本发明公开了一种CHO细胞表达的重组新型冠状病毒NCP‑RBD蛋白的制备方法及其应用,包括以下步骤:1细胞复苏培养:取工作细胞株进行复苏培养,得到细胞复苏培养物;2细胞扩增培养:将细胞复苏培养物进行扩增,得到细胞扩增培养物;3罐培养:将细胞扩增培养物进行罐培养,得
重组新冠病毒疫苗是将新冠病毒S蛋白受体结合区(RBD)基因通过基因工程技术,重组到中国仓鼠卵巢(CHO)细胞内,在体外培养并大量表达出RBD二聚体的方法。下列说法正确的是
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种CHO细胞表达的重组新型冠状病毒NCP-RBD蛋白的制备方法,包括以下步 骤: (1)细胞复苏培养:取工作细胞株进行复苏培养,得到细胞复苏培养物; (2)细胞扩增培养:将细胞复苏培养物进行扩增,得到细胞扩增培养物; (3)罐培养:将细胞扩增培养物进行罐培养,得到细胞收获液; (4)...
本发明公开了一种CHO细胞表达的重组新型冠状病毒NCPRBD蛋白的制备方法及其应用,包括以下步骤:(1)细胞复苏培养:取工作细胞株进行复苏培养,得到细胞复苏培养物;(2)细胞扩增培养:将细胞复苏培养物进行扩增,得到细胞扩增培养物;(3)罐培养:将细胞扩增培养物进行罐培养,得到细胞收获液;(4)纯化:对细胞收获液进行纯化,得到...
一种CHO细胞表达的重组新型冠状病毒NCP-RBD蛋白的制备方法及其应用专利信息由爱企查专利频道提供,一种CHO细胞表达的重组新型冠状病毒NCP-RBD蛋白的制备方法及其应用说明:本发明公开了一种CHO细胞表达的重组新型冠状病毒NCP‑RBD蛋白的制备方法及其应用,包括以下...