本发明提供一种琼胶酶融合酶工程菌株的构建方法,包括以下步骤:S1,质粒提取得到重组质粒Aga0917pMD19和CBM13pUC57DH5α;S2,PCR扩增得到Aga0917基因片段和CBM13基因片段;S3,Aga0917基因片段和CBM13基因片段的重叠PCR得到Aga0917CBM13;S4,Aga0917CBM13的末端加A;S5,末端
为了将某纳米抗体和绿色荧光蛋白基因融合表达,运用重组酶技术构建质粒,如图1所示。请回答下列问题:(1)分别进行PCR扩增片段F1与片段F2时,配制的两个反应体系中不同的有 ,扩增程序中最主要的不同是 。(2)有关基因序列如图2,引物F2- F、F1-R应在下列选项中选用 。A.ATGGTG--CAACCAB.TGGTTG--CACCATC.GACGAG...
科研人员构建了可表达J-V5融合蛋白的重组质粒并进行了检测,该质粒的部分结构如图甲所示,其中V5编码序列表达标签短肽V5。(1)与图甲中启动子结合的酶是 RNA聚合酶。除图甲中标出的结构外,作为载体,质粒还需具备的结构有 标记基因、复制原点(答出2个结构即可)。(2)构建重组质粒后,为了确定J基因连接到质粒中且插...
重叠PCR一步法对三种淀粉合成酶融合基因的构建
将ACS基因片段和ACO基因片段以反义 的方向插入到中间载体pB1221CaMV启动子的下游,酶切后获得含有CaMV启动子的ACS和 ACO基因的反义融合片段.将此包含启动子的反义融合片段连接到植物表达载体pCAM— BIA3301中,获得ACC合成酶基因和ACC氧化酶基因融合的反义表达载体,将构建好的植物表 达载体转化农杆菌LBA4404,用于...
蝴蝶兰ACC氧化酶和ACC合成酶融合反义表达载体的构建
为了将某纳米抗体和绿色荧光蛋白基因融合表达,运用重组酶技术(无缝克隆的一种)构建质粒,如图1所示。请回答下列问题:(1)进行PCR扩增片段F1时,一般需剔除荧光蛋白基因下游部分序列,以确保融合基因在后续表达时不受阻断。这里的“下游部分序列”包括 终止密码子对应序列和终止子等...
为了将某纳米抗体和绿色荧光蛋白基因融合表达,运用重组酶技术构建质粒,如图甲所示。请回答下列问题: (1)分别进行PCR扩增片段F1与片段F2时,配制的两个反应体系中不同的有___−,扩增程序中最主要的不同是___ (2)有关基因序列如图乙。引物F2− F、F1−R应在下列选项中选用 0 A.ATGGTGB.TCGTC (3)将PC...
葡萄糖脱氢酶融合表达载体的构建
本研究进行了构建人工多结构域纤维素酶的探索。采用基因融合的方法把内 切-β-葡萄糖苷酶基因eg2的3’端连接在纤维二糖水解酶Ⅱ基因cbh2的5’端形成融 合基因elc,该融合基因在巴氏毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115中成功表达。 cbh2、eg2均来自里氏木霉(Trichodermareesei)。用常规PCR方法从里氏木 ...