Co-IP全称Co-Immunoprecipitation，中文学名免疫共沉淀，是一种以抗体和抗原识别专一性为基础，用于研究蛋白质之间相互作用的经典方法。通俗点来说，假设我们需要研究样品中A蛋白和B蛋白之间是否存在一些相互作用，首先我们通过合适的方法处理样本，将蛋白提取出来（同时不能破坏蛋白之间的相互作用），然后用预先结合了琼脂...
免疫共沉淀(Co-IP)是利用抗原与抗体之间的专一性作用为基础,用于研究蛋白质与蛋白质之间相互作用的经典方法。利用免疫共沉淀可以检测两个已知蛋白之间的相互作用,或者利用已知蛋白寻找与之相互作用的未知蛋白。 相较于其他分子间相互作用...
特异性抗体捕获样品中的靶蛋白，形成抗体-靶蛋白复合物，然后利用能够与抗体结合的珠状支持物（例如Nanoab-Agarose）来固定和沉淀复合物，同时与靶蛋白相互作用的蛋白也会被沉淀下来，最后洗去与靶蛋白相结合的非特异性蛋白，再通过SDS-PAGE进行分析、Western blot检测得到我们要验证的结果。因此，Co-IP的实验步骤可大...
Co-IP是利用抗原蛋白和抗体的特异性结合、以及“Protein A/G"特异性地结合抗体(免疫球蛋白)FC段的现象开发出来的方法。 目前多用Protein A/G预先结合在Argarose Beads上,使之与含有抗原蛋白的溶液(如细胞裂解液)及抗体(诱饵蛋白X抗体)反应后,Beads上的Prorein A/G就能通过抗体吸附诱饵蛋白X,诱饵蛋白X通过与靶蛋...
1.Co-IP的定义&用途 2.Co-IP解读案例1 3.Co-IP解读案例2 4.Co-IP解读案例3 01 Co-IP的定义&用途 定义 免疫共沉淀技术是一种研究两种蛋白在体内是否存在相互作用的有效方法,通过抗体和已知蛋白结合,从而捕获整个已知蛋白复合物,进而研究复合物中与已知蛋白存在相互作用的蛋白。
CO-IP免疫共沉淀（Co-immunoprecipitation）是一种常用的生物化学技术，用于研究蛋白质间相互作用和蛋白质复合体的组成。通过该技术，我们可以了解蛋白质在细胞内的相互作用关系，揭示细胞信号传导、代谢调控等重要生物过程的机制。二、CO-IP免疫共沉淀的原理 CO-IP免疫共沉淀的原理基于抗体的特异性结合。首先，我们需要...
与普通 Co-IP 相比,Co-IP MS 是利用质谱来鉴定互作蛋白,普通 Co-IP 是使用 western 验证互作蛋白。两者前期 IP 的过程是没有差别的。Co-IP 本身不难,只要按照常规的步骤,严格的把控每一步的细节, Co-IP 的成功率就会很高。 Co-IP MS 流程 经验分享: (1)充足的样本量。足够的蛋白量是免疫共沉淀的关键...
CO-IP是一种利用抗体与目标蛋白质特异性结合的原理，将目标蛋白质与其相互作用的蛋白质一同沉淀下来的方法。具体步骤如下：1.细胞裂解：将目标蛋白质所在的细胞裂解，释放出细胞内的蛋白质。2.抗体结合：将特异性抗体与目标蛋白质结合，形成抗原-抗体复合物。3.免疫沉淀：将抗原-抗体复合物与蛋白质A/G磁珠结合，...
图1 Co-IP结果示例图（A代表protein A和B有相互作用，B代表protein A和B之间不存在相互作用）对结果进行分析之前，还需要了解图中的标注都是什么含义：IP：即指免疫沉淀（immunoprecipitation），用相应的抗体来纯化富集目的蛋白，例如图中“IP: Flag”的意思是用Flag标签抗体磁珠去拉Flag，与Flag融合表达的蛋白为...
一、Co-IP技术验证蛋白泛素化修饰 蛋白质泛素化是一种重要的蛋白质翻译后修饰过程,涉及将泛素分子共价连接到特定蛋白质的赖氨酸残基上。泛素化过程:泛素化是一个由三类酶催化的级联反应,包括:E1泛素激活酶首先将ATP的能量用于激活泛素分子,并与泛素形成一个高能硫酯键;E2泛素结合酶(又称泛素载体蛋白)从E1接收激活...