蛋白酶K(Proteinase K)是一种碱性丝氨酸蛋白酶,Wolfgang Ebeling等于1974年在林伯氏白色念球菌的培养基中分离纯化出来。因合成该种蛋白酶的微生物能在以角蛋白(Keratin)作为唯一碳源和氮源的环境中生长,因此…
蛋白酶K(EC 3.4.21.14)属于枯草杆菌蛋白酶家族,是由林伯氏白色念球菌(Tritirachium album Limber)产生的一类主要蛋白酶。因其能消化角蛋白(keratin),故将其称作蛋白酶K。蛋白酶K具有稳定的结构、极高的酶活力和广泛的底物特异性,但偏好于带有脂肪族及芳香烃的肽链,能优先分解与疏水性氨基酸、含硫氨基酸、...
在核酸提取实验中蛋白酶K的工作浓度大约是0.05-0.2mg/mL,一般情况下,提取一个样本的核酸大约需要0.1mg的蛋白酶K ,而在实际使用过程中,为了增加核酸提取效率,通常会将蛋白酶K进行加量使用。新冠病毒的核酸检测量剧增,造成对蛋白酶K需求激增,蛋白酶K原有的供需平衡被迅速打破,导致蛋白酶K一夜之间成为了紧缺的防疫物...
蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前标本的处理,它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用,以利于检测探针的穿透,提高检测的敏感性。 04 在灭活生活和工业用水中细菌的应用 病毒外层结构一般以衣壳蛋白为主,蛋白酶K可以对病毒衣壳蛋白进行破坏,从而干扰病毒与宿主细胞的结合。在一定条件下,67....
蛋白酶K通常用于蛋白质水解,它是一种能够分解蛋白质的酶。 蛋白酶K的作用机制主要是通过催化蛋白质中的肽键水解,从而将大分子蛋白质分解成小分子肽或氨基酸。这种酶在生物化学研究、分子生物学实验以及某些工业应用中非常常见。它对蛋白质的分解作用广泛,可以作用于多种蛋白质,包括但不限于血红蛋白、肌红蛋白、胶原...
蛋白酶K目前主要应用于基因诊断试剂盒、基因组DNA 提取试剂盒、RNA提取试剂盒中去除核酸酶和其它蛋白污染。在病毒核酸提取中的应用 (1)裂解病毒的外壳蛋白,暴露核酸分子,并且病毒外壳蛋白失活可进一步保证运输和检测阶段更安全;(2)降解与核酸紧密结合的组蛋白,使得核酸游离到提取液中,有利于进一步纯化;(3)...
蛋白酶K(Proteinase K)是一种非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶,基因序列来源于白色念球菌白色念球菌,具有很高的比活性。用于mRNA和DNA与蛋白质的分离。 蛋白酶K的作用: 蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理,具有消化包围靶DNA蛋白质的作用,以增加探针与靶核酸结合的机会提高杂交信号。但蛋白酶K...
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蛋白酶K是一种从白色念珠菌分离出来的强力蛋白溶解酶,具有很高的比活性,是DNA提取的关键试剂。该酶在较广的pH范围(4〜12.5)内及高温(50〜70°C)均有活性,用于质粒或基因组DNA、RNA的分离。在DNA提取中,主要作用是酶解与核酸结合的组蛋白,使DNA游离在溶液中,随后用不同方法进行抽提,除去杂质,收集...