Ni-NTA和GST标签琼脂糖磁珠是一种专为高效、快速纯化His tag和GST标签融合蛋白而设计的一种新型超顺磁性微球产品。可通过磁性分离方式直接从生物样品中一步纯化出高纯度的目标蛋白。与传统柱层析方法相比,磁珠纯化法极大地简化纯化工艺和提高纯化效率。适合科研和工业领域快速便捷地进行His和GST标签蛋白的纯化。 原理 ...
NTA镍磁珠——Si -NTA-NiNTA螯合Ni磁珠是非常稳定的八面体结构,Ni位于结构的中心,可以保护竞争性小分子对Ni的进攻,因此结构更稳定,可以耐受一定浓度还原剂、变性剂、去污剂等各种小分子对Ni的影响。 部分采用本磁珠文献 1. Jia Wang, Jiawei Liang, Yonghong Li, Lingmin Tian Yongjun Wei. Characterization of...
PureCube Ni-NTA琼脂糖在DTT和EDTA存在下非常坚实,在稳定性测试中,将PureCube Ni-NTA琼脂糖置于DTT与EDTA浓度逐渐升高的环境中处理1小时。再用处理过的凝胶在重力层析柱中纯化大肠杆菌表达的GFP-His,凝胶的蛋白结合能力因存在DTT与EDTA而下降,但是衰减率平缓,即使在1.5 mM EDTA,凝胶依然具有其最大结合能力的54%。
产品名称:His标签蛋白纯化试剂盒(Ni-NTA) 英文名称:Ni-NTA Beadose Resin Kit 产品货号:GS4661 产品规格:1盒 储存条件:冷藏(2-8℃) 概述 该介质的基质为90μm的高度交联琼脂糖,金属离子螯合配基经共价连接具有良好的稳定性。螯合配基带有二价的Ni2+,是纯化多数组氨酸标签蛋白的*介质。该介质的配基密度经过优...
表1 IDA与NTA的比较 当两种配体都有两个价位可以与组氨酸残基的咪唑基相互作用时,配位数对纯化到的蛋白质量有影响。首先,作为一个三价配体(配位数为3),IDA的金属离子漏出率极高,尤其是在平衡和洗脱步骤。尽管NTA琼脂糖的洗脱成分中也含有部分漏出的金属离子,但明显少于IDA树脂。第二,由于目标蛋白性质的变化,用...
Ni-NTA琼脂糖纯化树脂是以6%交联的琼脂糖为基质,通过化学方法偶联了四配位的氮川三乙酸(NTA)螯合镍离子(Ni2+)后的产品,性质更加稳定,可以纯化组氨酸标签蛋白。Ni-NTA树脂可用于各种表达来源(如大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞等)的组氨酸标签蛋白的纯化。在含组氨酸标签的重组蛋白表达后,可以利用变性或非变性...
Ni-NTA 蛋白纯化说明书 Author: 林怀樱 操作步骤: 1. 2. 3. 4. 5. 将重组质粒阳性转化子挑出到 5ml 液体培养基中过夜培养。 从过夜培养物中吸取 1ml 加入 100ml 液体培养基进行 37℃振荡培养 2~4h。 向培养物中加入终浓度为 0.2-0.5mmol/L 的 IPTG, 继续培养 2~4h。 10000 转离心 10 分钟, 弃...
Ni-NTA亲和树脂灌装层析柱或直接使用预装柱,层析柱下端接核酸蛋白检测仪。 (所有溶液/样品液使用前建议离心或用0.22μm 或0.45μm滤膜过滤后再上柱。) 2.1 用3～5倍柱床体积的去离子水冲洗掉层析柱树脂保护液。 2.2 使用至少5倍柱床体积的裂解缓冲液平衡层析柱。
基础材料/ His标签蛋白纯化填料/Ni-NTA镍离子凝胶/100纳米/孔径20纳米/低孔容/低堆积密度/低孔径分布密度/40%琼脂糖/20%NTA/30%镍离子/创新生产工艺 用途:His标签蛋白等生物分子的分离纯化 工艺特点:1. 特异性加…
固定化金属离子亲合层析(IMAC)是纯化组氨酸标签融合蛋白最常用的方法。选择性地负载共价金属离子(比如镍或钴)的IMAC层析介质能够截留组氨酸标签蛋白,并在变性条件下,能从包涵体中纯化出不溶性的组氨酸标签蛋白。Ni是最常用的螯合金属离子,与之配套的Resin配体主要为亚氨基二乙酸(IDA)和氮川三乙酸(NTA)。