荧光蛋白吸收峰由内部生色团结构决定。生色团是蛋白质内部特定氨基酸经过化学反应形成的发光基团。以绿色荧光蛋白为例,其生色团由丝氨酸、甘氨酸、酪氨酸三个氨基酸环化形成。这种特殊结构让它在395nm和475nm处有两个吸收峰,主峰在395nm。当用395nm紫外光激发时,生色团吸收能量进入激发态,随后通过能量转移释放出...
在分析白蛋白时,常常使用紫外-可见光谱(UV-VIS)来测量其吸收光谱。白蛋白的吸收光谱通常会显示一个或多个峰,其中最显著的峰被称为白蛋白的吸收峰。 1.什么是吸收光谱 吸收光谱是指物质在吸收特定波长的光时所表现出的吸收现象。当光通过物质时,物质分子吸收了光的能量,并将其转化为分子内部的激发态能量。吸收...
蛋白质在280nm处的紫外吸收峰主要源于其分子内含有芳香族氨基酸的共轭双键结构。这些氨基酸包括: 1. **酪氨酸(Tyr)**:在275-290nm范围有强吸收,其酚羟基的共轭体系直接导致280nm处的吸收峰。 2. **色氨酸(Trp)**:吲哚环的共轭结构使其在280nm附近的吸收更强,是主要的贡献者。 3. **苯丙氨酸(Phe)**:...
一是由于其含色氨酸残基和酪氨酸残基,其分子内部存在着共轭双键,在280nm处有一吸收峰;二是因肽键存在而引起的,在200~220nm处有一吸收峰.此两处吸收峰都可用于蛋白质的定量测定,但以前者为常用. 因为大部分文献和科研资料都是用280nm,如果你用220nm和别人的数据对不上…… 分析总结。 一是由于其含色氨酸残...
绝大多数蛋白在415nm处没有吸收峰 蛋白质分子中含有酪氨酸、色氨酸及苯丙氨酸等残基,它们的结构中具有共轭双键,对紫外光有吸收作用,其最大值在280nm波长处。当然也有些结构异常的蛋白可能会有例外,比如氨基酸Tyr 是275nm,Phe是257nm,如果含有大量Phe的蛋白质可能吸收峰最大值就不是280nm了。但...
吸收峰的强度能用来初步估算蛋白质的浓度 。不同种类蛋白质在260nm吸收峰表现有差异 。蛋白质中的一些特殊基团会影响260nm吸收峰 。核酸污染会对蛋白质260nm吸收峰测定有干扰 。260nm吸收峰受蛋白质分子的构象变化影响 。某些氨基酸残基对260nm吸收峰贡献较大 。缓冲液成分可能改变蛋白质260nm吸收峰情况 。 温度...
白蛋白在紫外-可见光谱(UV-Vis)范围内具有吸收性质,其吸收峰位于约280nm处。这个吸收峰被称为白蛋白的吸收峰。吸收峰的强度与白蛋白的浓度成正比,因此可以通过测量吸光度来确定白蛋白的浓度。 4. 测定白蛋白浓度的方法 测定白蛋白浓度是临床化验中常见的操作之一。以下介绍两种常用的方法: 4.1 比色法 比色法是...
原因:由于蛋白质中有酪氨酸,色氨酸和苯丙氨酸存在,所以大多数蛋白质在280nm波长处有特征的最大吸收。例如:色氨酸的吸收峰是280nm(吲哚环)。可用于测定0.1~0.5mg/mL含量的蛋白质溶液。取9支试管分别标号,前8支试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液,1号试管不加标准蛋白溶液,最后一支试管加待...
蛋白质的紫外吸收主要来源于其含有的芳香族氨基酸(色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸)。其中色氨酸和酪氨酸的最大吸收峰在280nm左右,苯丙氨酸的吸收峰较弱且在260nm。由于色氨酸的摩尔吸光系数最高,280nm被认为是蛋白质的最大吸收峰。A选项(200nm)对应肽键的吸收,属于远紫外区,并非主要检测波长;其余选项均不是蛋白质的...
蛋白质整体的构象和复杂的相互作用。在蛋白质溶液中,这些因素会相互影响,导致280nm处出现最大的吸收峰...